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生物:《现代生物科技专题》[新人教版选修3]
生物 选修3现代生物科技专题;目 录;专题1 基因工程;水母;基因工程的诞生和发展;2.工具基础
酶:
载体:;基因工程的发展;基因工程的工具;一、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”;原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵,但是生物在长期的进化过程中形成了完善的防御机制,以防止外来病原物的侵害。限制性核酸内切酶就是细菌的防御性工具,当外源DNA侵入时,限制性核酸内切酶会将外源DNA切割掉,以保证自身的安全。所以,限制性核酸内切酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效,从而保护自身的作用。;限制性核酸内切酶作用的是DNA分子中的什么键?;G A A T T C ;GAATTCCGTAGAATTCGGATT ;二、DNA连接酶——“分子缝合针”;2、分类;寻根问底:;三、基因进入受体细胞的载体
——“分子运输车”;思考:;2、作用
将外源DNA携带进受体细胞后,停留在细胞中进行自我复制或整合到染色体上,随染色体DNA进行同步复制。质粒DNA分子上有特殊的遗传标记基因,如抗四环素、氨苄青霉素等标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。;基因工程的一般过程与技术;1、从基因文库中获取;① 概念:PCR全称为_______________,是一项
在生物____复制___________的核酸合成技术 ;⑥过程:;引物; 若基因较小,核苷酸序列已知,也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。;1.用一定的_________切割
质粒,使其出现一个切
口,露出____________。
2.用_____________切断目
的基因,使其产生_____
____________。;质粒;复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因;补:原核细胞的基因结构;①不能转录为信使RNA,不能
编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;;三、转化受体细胞;1、将目的基因导入植物细胞;显微注射技术;用原核细胞作为受体细胞的原因?;四、筛选出获得目的基因的受体细胞;——检查是否成功;DNA分子杂交示意图 ;第二节 基因工程的应用;1、抗虫转基因植物;2、抗病转基因植物;3、其它抗逆转基因植物;用基因重组蓝玫瑰;1、用于提高动物生长速度;2、用于改善畜产品的品质;4、用转基因动物作器官移植的供体;这些药物包括细胞因子、抗体、疫苗、激素。如 胰岛素 、白细胞介素-2、干扰素、乙肝疫苗等近20种基因工程药物 ; 体外基因治疗 先从病人体内获得某种细胞,进行培养,然后,在体外完成基因转移,再筛选成功转移的细胞扩增培养,最后重新输入患者体内。(效果较为可靠)
体内基因治疗 直接向人体组织细胞中转移基因的治病方法;4 蛋白质工程的应用;一、蛋白质工程崛起的缘由; 在已研究过的几千种酶中,只有极少数可以应用于工业生产,绝大多数酶都不能应用于工业生产,这些酶虽然在自然状态下有活性,但在工业生产中没有活性或活性很低。这是因为工业生产中每一步的反应体系中常常会有酸、碱或有机溶剂存在,反应温度较高,在这种条件下,大多数酶会很快变性失活。提高蛋白质的稳定性是工业生产中一个非常重要的课题。一般来说,提高蛋白质的稳定性包括:延长酶的半衰期,提高酶的热稳定性,延长药用蛋白的保存期,抵御由于重要氨基酸氧化引起的活性丧失等。;例如:干扰素是一种抗病毒、抗肿瘤的药物。将人的干扰素的cDNA在大肠杆菌中进行表达,产生的干扰素的抗病毒活性为106 U/mg,只相当于天然产品的十分之一,虽然在大肠杆菌中合成的β-干扰素量很多,但多数是以无活性的二聚体形式存在。为什么会这样?如何改变这种状况?研究发现,β-干扰素蛋白质中有3个半胱氨酸(第17位、31位和141位),推测可能是有一个或几个半胱氨酸形成了不正确的二硫键。研究人员将第17位的半胱氨酸,通过基因定点突变改变成丝氨酸,结果使大肠杆菌中生产的β-干扰素的抗病性活性提高到108 U/mg,并且比天然β-干扰素的贮存稳定性高很多。;“后基因组时代”将是“蛋白质组学时代”,即从对基因信息的研究转向对蛋白质信息的研究,包括研究蛋白质结构、功能与应用及蛋白质相互关系和作用。
蛋白质工程就是在对蛋白质的化学、晶体学、动力学等结构与功能认识的基础上,对蛋白质人工改造与合成,最终获得商业化的产品。;二、蛋白质工程的基本原理;蛋白质工程的主要步骤通常包括:
(1)从生物体中分离纯化目的蛋白;
(2)测定其氨基酸序列;
(3)借助核磁共振和X射线晶体衍射等手段,尽可能地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构;;(一)蛋白质的分子设计与改造
蛋白质工程首先是以蛋白质的结构为基础,通过
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