含p53保守结合位点的microRNA表达载体的构建及应用.pdfVIP

含p53保守结合位点的microRNA表达载体的构建及应用.pdf

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生 术 通 讯 ???????????????????????? ????.·?—?一?、。?.·?一 ????.,??????? ???? ???:??.?????.????.?????????.????.??.???? 研 究 报 告? 含 ???保 守结合位点 的 ????????表达载体 的构建及应用? 秦性良?,苏雪婷?,丁红梅?,黄皑雪?,李慧?,侯绿滨?,葛兴枫?,李洁?,邵宁生?? ?.广西 医科 大学 ,广 西 南宁 ??????;?.军事 医学科 学院 基 础 医学研 究所 ,北 京 ??????? ?摘 要 ?? 目的 :构建含 ???保 守结合位 点 的???????????????表 达载体 ,促 进相关 ?????在 具有野生型 ???蛋 白细? 胞 中的高效表达 。方法 :改构 ?????表达 载体 ????—???,在其 多克隆位 点前插 入 ???保 守结合位 点 ,分 别将 ???一? ???、???一???和 ???一??前体序列 ???—???一???、???—???一???和 ???—???一??插入上述 改构 的载体 ????/???一???,将? 构建 的????/???一???一???、????/???一???????和 ????/???一???一??表达 载体转染具 有野 生型 ??? 的????细胞? 和不表达 ???的 ?????细胞 ,分析 ???对上述 ?????表达 调控 的影 响。结果 :转染 改构的 ?????表达 载体 后,????? 细胞 中???一???、???一???和 ??????的表达 水平 明显提高 ,它们对 应 的已知 靶基 因?????????、????和 ????的表? 达 同时被 显著下调。结论 :在 ???转录调控作 用下 ,具有 ???保 守结合 位点 的?????表达载体 能够 更加有效地提 高? ?????的表达水平 ;构建 的载体不但可用于促进相关 ?????的表达 ,也能用于 ?????是否 受???调控 的检测。? ?关键 词

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