内皮型一氧化氮合酶基因多态性与冠心病关系的论文.docVIP

　　内皮型一氧化氮合酶基因多态性与冠心病关系的论文 【关键词】冠心病；一氧化氮合酶,内皮；基因 　　摘要：目的探讨内皮型一氧化氮合酶(enos)基因内含子4可变串联重复序列(vntr)多态性与早发冠心病的关系。方法以医院为基础的病例对照研究，选择新诊断的冠心病患者为研究对象。男性≤55岁及女性≤65岁患冠心病为早发冠心病，以188例早发冠心病患者为病例组，315例迟发冠心病患者为对照组。应用聚合酶链反应(pcr)技术检测enos基因内含子4vntr多态性。结果enos基因内含子4vntrc/c、c/b、b/b、b/a、a/a基因型频率，早发冠心病组分别为053%，000%，8138%，1649%，160%；迟发冠心病组分别是000%，032%，7746%，2032%，190%。c/c+c/b+b/b与b/a+a/a基因型在2组之间分布差异无统计学意义(p=0268，or=1294，95%ci=0820～2043)。c、b、a等位基因频率，早发冠心病组分别是053%，8963%，984%；迟发冠心病组分别是016%，8778%，1206%。c+b与a的等位基因频率在2组间分布差异无统计学意义(p=0280，or=1257，95%ci=0830～1904)。在α=005显著性水平上，用多元逐步非条件logistic回归分析调整性别、吸烟、饮酒、收缩压、体质指数、腰臀比、甘油三酯和总胆固醇后，enos基因内含子4vntr多态性与早发冠心病也无显著相关(p=0427,or=0819,95%ci=0500～1341)。.结论enos基因内含子4vntr多态性可能不是早发冠心病发病的危险因素。 　　关键词：冠心病；一氧化氮合酶，内皮；基因 　　associationbetorphismofendothelialnitricoxidesynthasegeneandcoronaryheartdisease 　　humaohong，jiachongqi，liutongtao，etal. 　　departmentofepidemiologyandhealthstatistics,schoolofpublichealth,shandonguniversity(jinan250012,china) 　　abstract：objectivetoassesstheassociationbetorphisminendothelialnitricoxidesynthase(enos)geneandprematurecoronaryheartdisease(p-chd).methodsahospital-basedcase-controlstudyalesand65forfemalesorphismchainreaction(pcr)technique.resultsthegenotypefrequenciesofc/c,c/b,b/b,b/a,a/aultiplelogisticregressionanalysisat005significantlevelentofsex,smoking,alcoholdrinking,systolicbloodpressure,overtriglyceride,serumtotalcholesterolcovariatesshoorphismisnotariskfactorforp-chd. 　　key2)计算体质指数(bmi)，按腰围/臀围计算腰臀比(l，其中1ml用乙二胺四乙酸二钠盐(edta)-na抗凝，用于基因组dna提取；4ml分离血清，用于血清学检测。(3)血清生化指标检测：血清甘油三酯(tg)、总胆固醇(tc)用酶法测定，试剂盒由(北京中生生物工程高技术公司。) 　　122基因组 dna提取用十二烷基硫酸钠(sds)及蛋白酶k消化，酚/氯仿提纯，乙醇沉淀。 　　123enos基因内含子4vntr多态性检测以提取的dna为模板，根据设计的上、下游引物，用pcr方法特异性扩增含有可变串联重复序列的片段。引物序列，上游5′-ctcagcccagtagtgaagac-3′；下游5′-gcttctcttagtgctgtggt-3′。pcr反应体系总体积为30μl，其中含模板100ng，引物各03μmol/l，50mmol/lkcl，15mmol/lmgcl2，10mmol/ltris-hcl(ph=84)，015mmol/ldntps，15uextaqdna聚合酶(takara)。反应条件为95℃预变性5min，33个循环中95℃变性45s，58℃退火60s，72℃延伸45s，最后72℃延伸5min。pcr产物用8%的聚苯烯酰胺电泳，银染色观察实验结果。根据片段数量与长度进