小鼠减数分裂标本的制备及观察.ppt

小鼠减数分裂标本的制备及观察 ;【实验目的】 1. 理解小鼠睾丸组织减数分裂标本的制备技术 2. 掌握减数分裂过程中各期染色体的形态特征;【实验原理】 减数分裂是二倍体生殖细胞在形成配子时的一种特殊的细胞分裂形式。通过小数鼠丸细胞的体外培养以增加减数分裂相，获得分裂较高的标本;【实验内容】 一、标本制备过程 1. 处死动物，剥离睾丸。2. 取部分睾丸组织，匀浆取上皮细胞悬液。3. 悬液加入培养液小瓶，置培养箱内培养24小时。4. 培养终止前4小时，加入秋水仙素。5. 收取细胞0.075mol/L KCL低渗处理。6. 1000rpm离心8分钟，取沉淀。7. 甲醇：冰醋酸（3：1）固定。8. 滴片，Giemsa染色，镜检。 二、标本的观察 1、 精原细胞有丝分裂中期相，明确小鼠染色体数目40条。 2、 使用油镜找出减数分裂各时相，着重观察第一次减数分裂的形态变化。 前期I：细线期；偶线??；双线期；终变期。 中期I：四分体排列在赤道面上； 后期I：同源染色体移向两极； 末期I： ;;细线期 ;【作 业】 一、分别求出使用低倍镜(10X)，高倍镜(40X)时目镜测微尺每格代表的长度： 低倍镜：目镜测微尺每格代表的长度= ×lO(μm)= μm 高倍镜：目镜测微尺每格代表的长度= ×lO(μm)= μm 二、绘制所观察的人口腔上皮细胞并注明基本结构。 三、计算人口腔上皮细胞的核质比例。 计算细胞、细胞核体积的公式： 圆 形 V=4/3πr 3(r为半径) 椭圆形 V=4/3πab2(a、b分别为长、短半径) 核质比 N／D=Vn／(Vc—Vn)(Vn为核的体积，Vc是细胞的体积)