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应用数码相片鉴定西葫芦种子品种纯度试验报告的论文.doc
应用数码相片鉴定西葫芦种子品种纯度试验报告的论文
原文作者:马玉光
摘要:传统的西葫芦种子纯度鉴定方法是田间种植观察。为节约田间种植时间,对西葫芦杂交种和亲本种子及其幼苗的数码影像进行比对,结果发现,室内影像比对结果与田间种植鉴定结果基本吻合。将这种鉴定方法用于生产,可以极大地缩短品种纯度鉴定时间,节省开支。
关键词:数码相片;西葫芦种子;纯度鉴定
西葫芦制、售种单位每年都要进行种子的纯度鉴定,制种生产用的亲本要事先鉴定,f1代杂交种纯度也要鉴定。目前,国内种子纯度鉴定所采用的最普遍、最可靠的办法还是田间种植,开花结小瓜的考察方式,工作量大,耗时长,且费工、占地。制种单位委托农户生产杂交西葫芦种子,种子收获后一般在10月中旬。一般田间种植鉴定种子纯度要对果实特征鉴别,依据时间推算,纯度鉴定结果将到春节之后才能出来。委托方答应纯度结果出来后付款,而制种农户希望在春节前拿到制种款,为化解这一供需矛盾,寻求快速、准确、有效的品种纯度鉴定方法,经过分析,笔者尝试从杂交种与亲本幼苗上寻找区别,以期达到快速鉴定品种纯度的目的。
1 材料和方法
1.1 试验材料
杂交种hp400样品5个,每个样品500 g。母本h401,100粒。父本p402,100粒。
1.2 试验设备
光照培养箱、电热鼓风干燥箱、1 800万像素单反数码相机。5 cm×5 cm纸杯。人工气候室。14格横格式分样器。
1.3 试验方法
在实验室条件下,培育杂交种和亲本幼苗单株,至两片真叶展开。.用高像素数码相机,在幼苗生长期每天在固定时间用微距、大景深设置拍摄照片1次。将数码相片导入计算机归类排列,观察放大的整体性状,充分查看细微的差别,比对品种之间对应部位的差异。寻找杂交种与亲本品种幼苗可能存在的差异。
1.3.1 取得籽粒影像
10月8日,将父母本及杂交种子20粒,平铺到紫色纸上,4×5方式排列,微距拍成5184×3456图片,存入计算机。比对差异。
1.3.2 取得亲本幼苗影像
10月8日,将普通菜园土用设定温度160 ℃,60 min灭菌,冷却后装入5 cm×5 cm的纸杯,每个杯子侧面用记号笔标记序号、♂或♀标记,备用。
取父母本种子各20粒,用2%双氧水浸泡种子20 min,清水洗净。将父本单粒播于装好培养基的标记♂的纸杯,播种深度10 mm,每杯加入自来水20 ml,然后排列于15 cm×20 cm发芽盒加盖。母本用同样方法,播于装好培养基的标记♀的纸杯。放入25 ℃的光照培养箱培养。
10月12日,幼苗顶土露头,15日下午父本子叶开始展开,16日下午父本子叶全部展开,母本子叶开始展开,17日母本子叶全部展开,光照培养箱培养温度调整为夜间18 ℃,昼间22 ℃。
父本从16日开始,母本从17日开始,每天下午拍摄1次,单株拍摄,分别是侧视和俯视图。真叶展开后,对真叶叶柄、叶正面、背面、叶缘拍摄。图片存入电脑比对。10月23日第2片真叶展开,10月27日结束试验。
1.3.3 取得杂交种幼苗影像
播种时间、管理方法同亲本。拍摄照片情况同亲本。数量规模为50粒。真叶展开时间与父本同时。10月23日第2片真叶展开,10月27日结束试验。
1.3.4 重复试验
11月18日,根据第1次试验结果,用15 cm×20 cm发芽盒,直接装培养基,厚度4.5 cm,播种密度每盒4×5株,其中4株为母本,播于短边的一头,做好标记符号,16株为杂交种样品,试验过程管理与第1次试验相同。重复共做10个。拍摄照片的时间从子叶展开后,每天拍俯视片,每盒拍3张,到第2真叶展开3 d后结束。相片存入计算机进行比对。
1.3.5 杂交种样品测试试验
12月26日,用分样器分别从1号、3号2个杂交种样品中,随机分取200粒,按照重复试验的方法,播于10个发芽盒,标记样品编号,管理同上,拍照从真叶展开到第2片真叶展开结束。历时17 d。
1.3.6 样品测试试验
12月29日,用分样器分别从5个杂交种样品中,随机分取200粒,参照样品测试试验的方式,改用单格5 cm×5 cm方格,格数11×5个格的育苗盘,短边行播1行5粒母本,其余播杂交种样品种子,每个样品4盘,边框上标记样品编号及重复号,共20个盘,置于人工气候室培养,环境温度控制恒温25 ℃,每天检查培养基水分,及时补充。1月15日第1片真叶全部展开,将每1个盘分段拍照,每盘3张,记录照片序号和样品重复编号的对应关系,到1月21日第2片真叶展开,共连续拍5 d,共300张照片。
1.3.7 田间验证试验
2012年3月5日,生产商通报田间种植鉴定结果。2012年4月5日,笔者在郊区菜农生产田对
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