微波辐照对大鼠海马COXI、IV基因表达影响的论文.docVIP

　　微波辐照对大鼠海马COXI、IV基因表达影响的论文 【关键词】微波；海马；细胞色素c氧化酶；能量代谢 　　摘要：目的研究微波辐照后大鼠海马组织细胞色素c氧化酶(cox)亚基i、ivmrna表达变化和对酶活性的影响，探讨微波辐照对大鼠海马能量代谢影响的机制。方法采用rt-pcr法检测微波辐照后海马组织coxi、ivmrna水平，采用还原细胞色素c法和高效液相色谱法(hpic)分别检测微波辐照后海马组织细胞色素c氧化酶活性和三磷酸腺苷(atp)、二磷酸腺苷(adp)、一磷酸腺苷(amp)含量。结果微波辐照后，大鼠海马组织细胞色素c氧化酶活性和atp含量明显降低，并与coxi、ivmrna表达变化呈一致性。结论微波辐照可影响大鼠海马coxi、ivmrna表达而降低酶的活性，进而引起能量代谢障碍。 　　关键词：微波；海马；细胞色素c氧化酶；能量代谢 　　effectofmicrornaexpressioninhippocampusofrats 　　yujianhua,zhongmin,xieyan,etal. 　　departmentofoccupationalhygiene,thethirdmilitarymedicaluniversity(chongqing400038,china) 　　abstract：objectivetostudymrnaexpressionofcytochromecoxidase(cox)subunitⅰ,ⅳandactivityofcytochromecoxidaseinhippocampusofratsaftermicroolecularmechanismofmicroetabolismdeficitinhippocampusofrats.methodstheexpressionofcytochromecoxidasesubunitⅰandⅳmrnaaftermicroonophosphate(amp)andactivityofcytochromecoxidaseinhippocampusanceliquidchromatography(hplc)andreducedcytochromecmethodsrespectively.resultsdecreasedactivityofcytochromecoxidaseandcontentofatpinhippocampusecoxidasesubunitⅰandⅳmrnaicrornaandavtivityofcox,andfurthertoinduceenergymetabolismdeficitinhippocampusofrats. 　　keyicropus;cytochromecoxidase;energymetabolism 　　现代生活与微波技术的应用密切相关，由此导致的环境污染问题已引起了广泛关注。.本研究选择在细胞色素c氧化酶(cox)活性中起主要作用的催化亚基ⅰ和调节亚基ⅳ为观察指标，观察微波对cox活性和基因表达的影响，以期探讨微波辐照致大鼠海马能量代谢改变的分子机制。 　　1材料与方法 　　11材料(1)实验动物：健康雄性j公司)；凝胶成像系统(美国bio-rad公司)；du640紫外分光光度计(德国beckman公司)；高效液相色谱仪(日本岛津公司)。(4)试剂：coxi引物(上游：5′gctgctaatactggcagtgaga3′，下游：5′gcttcggaaactgacttgtacc3′，扩增片段约381bp)；coxiv引物(上游：5′ggcagcagtggcagaatgttgg3′,下游：5′acaagcgcagtgaagccgatga3′,扩增片段约364bp)；内参βactin(上游：5′taaagacctctatgccaacacagt3′,下游：5′cacgatggaggggccggactcatc3′，扩增片段约241bp)，所有引物由上海sangon公司合成。atpna2、adpna2、cytc(美国sigma公司)。 　　12方法 　　121动物辐照动物置于可透谢微波的专用辐照盒内，在反射近似零的辐照暗室接受全身一次性辐照20min，辐照环境温度和湿度用设备保持恒定，温度(18±2)℃，湿度50%～70%，对照组除不接受辐照原的作用外其他处理条件与辐照组一样。 　　1.2.2海马组织腺嘌呤核苷酸测定［1］将大鼠断头处死，冰浴条件下分离海马，准确称重，按20μl/mg组织加入预冷的02mol/l高氰酸匀浆，4℃，18000g离心15min，上清液用1mol/l碳酸钾中和并调ph至65～70，重复离心1次，取上清液作高效液相色谱分析，采用公式ec(energycharge,ec)=(atp+