松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖成分的影响的论文.docVIP

　　松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖成分的影响的论文 【摘要】 目的 观察松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖含量的影响及发酵茯苓菌丝与天然茯苓多糖含量的差别。方法 加松根液与不加松根液发酵培养茯苓菌丝,将两者在菌丝产量、水溶性多糖含量方面进行比较;并将发酵菌丝与天然茯苓进行水溶性多糖含量比较。结果 加松根液发酵培养的茯苓菌丝产量有提高,但水溶性多糖含量下降;发酵菌丝较天然茯苓水溶性多糖含量显著提高。结论 松根液对发酵茯苓菌丝产量和多糖含量的影响不同;发酵茯苓菌丝多糖含量高于天然茯苓。 【关键词】 松根液;发酵;茯苓菌丝;茯苓多糖 effects of pine root solution on production and polysaccharides of fermentation poria mycelia acy college, hunan university of tcm, changsha 410208, china) 　　abstract：objective to study the effect of pine root liquid on the fermentation poria mycelia yield and content of entation poria mycelium and the natural poria. methods poria mycelia ented liquid, the production of entation mycelia and natural poria entation poria mycelia cultured ycelia entation poria mycelia yield and polysaccharide content. entation mycelia entation;poria mycelia;pachymaran 　　茯苓(poria cocos in后备用。试剂均为国产分析纯。 　　1.2 主要仪器 　　hzq-f160全温震荡培养箱(江苏太仓市华美生化仪器厂),uv-9200紫外-可见光分光光度计(北京瑞利分析仪器公司),电子天平(上海康平仪器仪表有限公司),恒温干燥箱(宁波江南仪器厂),cl-20m高速冷冻离心机(赛特湘仪离心机仪器有限公司)。 　　1.3 液体发酵培养基 　　葡萄糖30 g,酵母浸膏3.9 g,蛋白胨5.1 g,k2hpo4 1 g, mgso4·7h2o 0.5 g,水1 l[1-2]。 　　2 方法与结果 　　2.1 发酵茯苓菌丝的制备 　　试验分为发酵茯苓菌丝对照组(对照组)、0.5%松根液发酵茯苓菌丝组(0.5%松根液组)、1%松根液发酵茯苓菌丝组(1%松根液组)、2%松根液发酵茯苓菌丝组(2%松根液组)。取250 ml干净锥形瓶,分别加入60 ml液体发酵培养基,其中松根液组分别加入0.3、0.6、1.2 ml 100%的松根液,使其成为含松根液相对应浓度的发酵培养基。放入高压蒸汽锅中121 ℃灭菌20 min。自然冷却后于接种操作台中接种茯苓菌种,接种完毕后将培养瓶置于全温震荡培养箱中培养。培养条件：避光,温度25.6 ℃,转速150 r/min。培养144 h后,取出,离心,收集菌丝,58 ℃恒温干燥后称重。对照组及0.5%、1%、2%松根液组菌丝干重分别为13.990、14.110、14.325、14.340 g/l。 　　2.2 茯苓菌丝多糖测定 　　2.2.1 茯苓多糖制备 精密称取各组发酵茯苓菌丝干燥样品各2.5 g及天然茯苓块(茯苓块组)、天然茯神块(茯神块组)样品各7.5 g(因天然茯苓和茯神2.5 g时多糖成分太少,故将用量增加到7.5 g),分别精密加入20倍样品量的蒸馏水,精密称重。煎煮1 h,放冷至室温,补充加入蒸馏水至原来重量。离心后,取上清液。各发酵茯苓菌丝组取30 ml上清液,浓缩至5 ml,茯苓块、茯神块组取上清液90 ml浓缩至15 ml。分别加入3倍量无水乙醇,静置3 h后,离心,取沉淀。分别用无水乙醇洗涤2次,干燥后称重[3-4]。见表1。表1 茯苓多糖沉淀率 　　2.2.2 葡萄糖标准曲线 精密称取10 mg葡萄糖,溶解于100 ml容量瓶中,分别吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.9 ml,分别加入0.7 ml 5%苯酚,迅速加入3.0 ml浓硫酸,蒸馏水定容至5 ml,振摇5 min,于494 nm处测定吸光度。以葡萄糖浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标,得回归方程：y=12.779x-0.021 1, r2=0.992 3。见表2。表2 葡萄糖标准曲线 　　2.2.3 供试品溶液的制备 取“2.2.1”项各组茯苓多糖沉淀物,用蒸馏水溶解后