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桂枝甘草汤方药半仿生提取醇沉法最佳醇沉浓度的优选的论文.doc
桂枝甘草汤方药半仿生提取醇沉法最佳醇沉浓度的优选的论文
【摘要】 目的 优选桂枝甘草汤方药半仿生提取醇沉(sbae)法最佳醇沉浓度。方法 用优选的最佳半仿生提取工艺,最佳组合方式混煎制备提取液,对提取液分别作甘草次酸、肉桂酸、总黄酮、干浸膏的含量测定,优选最佳醇沉浓度。结果 醇沉浓度为70%的sbae液综合评价y值明显高于其他醇沉浓度的sbae液。结论 桂枝甘草汤sbae法的醇沉浓度以70%为佳。
【关键词】 桂枝甘草汤;半仿生提取法;醇沉浓度
abstract:objective to optimize the alcohol concentration of guizhi gancao decoction extracted by semi-bionic alcoholic extraction (sbae). methods extracts i-bionic extraction technology and the best bination method. the contents of glycyrrhetinic acid, cinnamic acid, total flavones, volatile oil and dry extract in the each extract ined. results prehensive evaluation y of 70% alcoholic sbae extract i-bionic extraction;alcohol concentration
桂枝甘草汤由桂枝、炙甘草组成,具有补心助阳、生阳化气、补阳扶中的作用。.根据半仿生提取法(sbe)理论[1-5],在用均匀设计优选出桂枝甘草汤方药sbe法工艺条件和最佳组合方式的基础上[6-7],为进一步优选该方半仿生提取醇沉法(sbae)的最佳醇沉浓度,笔者以甘草次酸、肉桂酸、总黄酮、干浸膏得率为指标,对该方药做了各种醇沉浓度的平行对照试验,现报道如下。
1 仪器与试药
phs-3c型精密ph计(上海雷磁仪器厂);ma110型电子分析天平(上海第二分析仪器厂);lxj-ⅱ型离心沉淀机(上海第三分析仪器厂);754紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);vp高效液相色谱仪(shimadzu corporation assembled in china),spd-10a检测器,lc-10at泵;kq-250e型医用超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);re-52aa型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)。
实验用药材经山东中医药大学张兆旺教授鉴定。桂枝为樟科植物肉桂cinnamomum cassia presl的干燥嫩枝;甘草为豆科植物甘草glycyrrhiza uralensis fisch.的干燥根及根茎。炙甘草:取炼蜜,加适量冷开水稀释后,淋入净甘草片中,拌匀,闷润,置炒制容器内,用文火加热,炒至老黄色,不粘手时取出,晾凉(每100 kg甘草片用炼蜜25 kg)。甘草次酸、肉桂酸、柚皮苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用,批号分别为723-200109、0786-9802、722-200107)。甲醇为色谱纯,水为重蒸馏水,其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 提取液的制备
将处方药材分别粉碎,按处方比例(桂枝∶甘草=2∶1)称取药材粗粉240 g(过10~20目筛)。用优选出的组合方式,即桂枝与甘草混煎的方式,用sbe法提取(双提法;第1煎用水用0.1 mol/l hcl调至ph为2.04,第2、3煎用水用0.1 mol/l naoh调至ph为7.25、8.51;加水量依次为药材重量的10、8、8倍;煎煮时间依次为190、95、45 min;双提法提取的挥发油单独存放),分别滤过,离心,合并上清液,水浴浓缩至800 ml。
取浓缩液100 ml共6份,调ph值为7.5,加入95%的乙醇调至醇浓度为30%、40%、50%、60%、70%、80%,冷藏放置24 h,离心,上清液回收乙醇至无醇味后,分别用蒸馏水定容至100 ml(每1 ml相当于原药材0.3 g)。
2.2 供试液的制备
精密量取提取液各10 ml,加水35 ml,缓缓加入盐酸4 ml,静置30 min,待气泡消失后,再加盐酸1 ml、氯仿30 ml,水浴加热回流1.5 h,放冷,移至分液漏斗中,静置,分取氯仿层,水层用氯仿萃取(20 ml×2),回收氯仿,残渣用无水乙醇定容至10 ml,得供试液a(每1 ml相当于原药材0.3 g)。
精密量取提取液各15 ml,分别置蒸发皿中,加硅藻土4 g,拌匀,水浴蒸至近干,80 ℃烘干,研细,加乙酸乙酯40 ml,超声提取20 min,滤过
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