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　　激光照射对Jurkat细胞CD59活化途径的影响的论文 激光照射对jurkat细胞cd59活化途径的影响 【关键词】 抗原，cd59;jurkat细胞;激光 【摘要】 目的 研究低功率hene激光照射对jurkat细胞cd59活化途径的影响。方法 将前期培养的jurkat细胞随机平均分为3组:a组细胞不做任何处理, b组细胞每日定时进行7 min的hene激光照射,c组细胞每日定时进行10 min的hene激光照射。1周后用cd59单克隆抗体作用jurkat细胞，用mtt法检测jurkat细胞增殖情况，激光共聚焦方法观察细胞内ca2+浓度变化，流式细胞术检测jurkat细胞cd25表达。结果 b、c组jurkat细胞增殖率、ca2+浓度和cd25表达均高于a组(f=41.390～63.938，q=10.907～24.497，plt;0.01); b组和c组间比较差异无显著性(pgt;0.05)。结论 低功率hene激光照射可以促进jurkat细胞经由cd59单克隆抗体刺激后的活化，增强活化信号的传导。 【关键词】 抗原，cd59;jurkat细胞;激光 　the effects of he???ne laser irradiation on cd59 activate channel in jurkat cells xu he, gao meihua (department of immunology, qingdao university medical college, qingdao 266071, china) ; [abstract] objective to study the effect of loethods prophase cultural jurkat cells ized to three groups: group a al control; group b, jurkat cells in daily; group c, the cells in daily. one onoclonal antibody ation test (mtt assay). laser confocal technique ployed to observe the changes of calcium ion concentration (cic) etry to detect the expression of cd25 in jurkat cells. results the groulated by cd59, strengthening the conduction of activation signals. 　　[key i 1640 培养液及标准胎牛血清购于gibco公司, mtt由中国医学科学院血液研究所提供,hepes购于solarbio公司,fluo3/am购于biotium公司，fitc标记及辣根酶标记鼠抗人igg购于北京中杉金桥公司。 hnzsqⅱ型氦氖激光照射器为上海医用激光仪器厂产品。 　　1.2 细胞分组与照射 　　选取生长状态良好的jurkat细胞，经过吹打混匀后，调整细胞密度为5×1010/l的细胞悬液，将0.1 ml的细胞悬液滴加于24孔扳中。将24个板孔分成3组，每组8孔。a组为对照组，不进行照射;b组每日进行7 min的hene激光照射;c组每日进行10 min的hene激光照射。采用hnzsqⅱ型氦氖激光照射器，输出功率为24 m2，照射距离为50 cm，光斑直径为0.5 cm，原束照射，每日调整细胞密度为5×1010/l，10 d后收集细胞。 　　1.3 mtt法检测jurkat细胞增殖活性 　　调整a、b和c组细胞密度为5×107/l，加入96 孔板中,每孔100 μl。设定空白对照组、cona对照组、cona+cd59mab组,每组各设8个复孔,每孔加试剂50 μl。放入含体积分数0.05 co2的37 ℃温箱中孵育48 h。加mtt,每孔10 μl,振荡混匀,放入含体积分数0.05 co2 的37 ℃温箱中孵育4 h。加入100 g/l sds0.02 mol/l hcl,每孔100 μl,充分吹打混匀20 min 至完全溶解。酶标检测仪测570 nm 波长处吸光度(a)值。以各样本测定孔a(a1) 值减对照孔a(a2)值,求得a差值(△a),计算jurkat细胞增殖率。jurkat细胞增殖率=△a/a2×100%。重复3次取平均值。 　　1.4 激光共聚焦方法检测细胞内钙离子浓度 　　取前期准备的jurkat细胞，调整细胞密度为5×1010/l，用hepes缓冲液(ph 7.4)将细胞清洗3次,加入10 μmol/l fluo3/am