精氨酸--容星_易方勇_肖军.pptVIP

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精氨酸--容星_易方勇_肖军

精 氨 酸;精氨酸英文名arginine; 缩写:Arg 学名:2-氨基-5-胍基-戊酸 L-精氨酸是蛋白质合成中的编码氨基酸,哺乳动物必需氨基酸和生糖氨基酸。而D-精氨酸在自然界中尚未发现。 精氨酸是一种α氨基酸,亦是20种普遍的自然氨基酸之一。一种复杂的氨基酸,在幼儿生长期,精氨酸是一种必需氨基酸。;精氨酸结构式;L―精氨酸的作用;;L-精氨酸提取的常用两种方法;强酸水解提取法: 以人、动物(主要是猪)的毛发或者猪血原料。 优点:技术成熟、在国内的毛发来源便宜、伴有胱氨酸同时产出(成本低) 缺点:对环境污染严重、使用强酸等化学原料、有动物性来源杂质。 ;我国国内都是采用的水解法提取精氨酸 1. 特殊沉淀法 2. 电渗析法 3. 离子交换法 从毛发水解后制取的胱氨酸母液中提取L-精氨酸 ;生物发酵工艺: 以葡萄糖和玉米桨等为主原料 优点:采用全天然农作物为原料,不使用动物源材料、大规模生产具有成本优势。 缺点:技术含量高,工艺要求比较严格,投资相对较大。 ;L-精氨酸的生物合成途径及代谢调节机制;L-精氨酸代谢没有分支途径,从中间代谢产物谷氨酸直接合成终产物精氨酸共需8步反应。 目前,L-精氨酸合成路径有3条: Ⅰ型途径:在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌中在氨基甲酰磷酸和天冬氨酸作用下生成L-精氨酸。此途径的第1个酶为关键酶,受L-精氨酸的反馈抑制和阻遏,其他的酶受其阻遏。 Ⅱ型途径与Ⅰ型途径不同处是多了1个乙酰基循环反应。该途径的关键酶是第2个酶——N-乙酰谷氨酸激酶,受终产物精氨酸的反馈抑制和阻遏。;精氨酸合成途径关键处是氨基甲酰磷酸合成。氨基甲酰磷酸合成的关键酶——氨基甲酰磷酸合成酶有3个独立的酶活位点,受UMP和鸟嘌呤的变构调节 。 合成精氨酸的第3条途径,为典型的鸟氨酸转移酶依赖途径。N-乙酰鸟氨酸和氨基甲酰磷酸在氨基甲酰磷酸转移酶作用下,生成N-乙酰瓜氨酸,再经脱乙酰化生成瓜氨酸,进而合成精氨酸。;发酵的代谢控制育种策略;由突变菌种发酵生产氨基酸;钝齿棒杆菌的选育;代谢途径的的分析及育种策略;由转导子发酵生产精氨酸; 分析问题: 选育在赖氨酸存在时能够利用乙酰赖氨酸生长的Lysˉ菌株。则其精氨酸生物合成酶系的阻遏能解除。另外,野生菌株能够以精氨酸或其脱羧产物---鲱精胺作唯一氮源生长。;Sr4(野生菌种);解决问题:; 基因工程菌发酵生产精氨酸;国外氨基酸生产菌的研究;国外精氨酸产生菌研究进展;2 基因工程育种: (1)Caldara等利用芯片杂交技术和PCR技术分析发现的… (2)Shi等用凝胶过滤色谱分析研究NAGS,第一次从晶体结构分析它。 (3)Ikeda等以三株谷氨酸棒杆菌突变株为出发菌株进行基因重组,获得高产精氨酸菌株。;结 语

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