蛋白质与酶工程第三章酶的分离纯化层析技术学案.pptVIP

酶的分离纯化 离心技术;第四章 层析技术;引言;层析法的基本原理;层析法的分类;引言;1906年俄国植物学家茨维特（Michael Tswett）: 将碳酸钙细粉装入玻璃瓶， 石油醚抽提叶子的色素溶液倾入， 接着倒入石油醚洗涤， 柱上部出现了绿色的叶绿素， 中间是黄色的叶黄素， 而在下面则是胡萝卜素橙黄色 色带叫作“色谱”， 方法叫色谱法（Chromatography), 层析法 。;概念:;1905-1930. Who cares! Why？ 1931年德国库恩(Kuhn)重复了茨维特实验, 用氧化铝和碳酸钙分离了α-,β-,和γ-胡萝卜素，此后用这种方法分离了60多种这类色素，1938年他从维生素?B?中分离出?B?6. 1938年的诺贝尔化学奖。;相同时期发生在中国大地的事件;1941年生物化学家Martin（马丁）和Synge（辛格）把色谱法应用于氨基酸的分离。 将淀粉作为色柱里的填料:淀粉色谱法 滤纸作为载体: 纸色谱法;塔板理论;分配系数, partition coefficient:在平衡状态下，组分在固定相中的浓度和在流动相中的浓度之比. 例: 将MgCl2溶解于辛醇和水的混合液体, 分别测量MgCl2在辛醇和水中的浓度,计算比值. 好溶解的分配系数小, 不好溶解的分配系数大. ;1952年，马丁同詹姆斯(James)，把LLC技术原理应用在分离气体上。 各