附子多糖硫酸降解的研究的论文.docVIP

　　附子多糖硫酸降解的研究的论文 作者：张媛媛,易剑平,秦文杰,吕圭源,叶祖光 【摘要】 目的 在常态和超声条件下,对附子多糖在硫酸中的降解进行研究。方法 采用l9(34)正交设计,以酸浓度、反应时间、反应温度和超声功率为参数,以降解后产物中低分子量多糖含量为指标,对附子多糖在常态和超声条件下的硫酸降解进行优选。结果 常态条件下的硫酸降解,在酸浓度为10%、100 ℃下反应2 h最佳,此时低分子量多糖含量约为36.17%。超声条件下的硫酸降解,在超声功率150 a typhonii polysaccharide al and ultrasonic condition. methods the orthogonal test table l9(34) ize 4 factors including acid concentration, reaction time, reaction temperature and ultrasonic poolecular-al conditions of disposing rhizoma typhonii polysaccharide al condition，and the yield of loolecular-al conditions olecular-a typhonii polysaccharide；orthogonal test；degradation 到目前为止,已有300多种多糖类化合物从天然产物中被提取出来,而且由于它们的独特功能和低毒性,使得其在作为抗肿瘤新药的临床应用中显示出越来越广阔的前景。有研究表明,从附子中提取的多糖具有降血脂、提高免疫力[1]、抗肿瘤等方面的药理作用。但由于附子多糖提取物中的大分子量多糖存在水溶性较差、不利于生物吸收等特点,而且含量较多,为了提高附子多糖的利用度,笔者对附子多糖的硫酸降解进行了研究。 　　1 仪器与试药 kq3200de超声波清洗仪(江苏省昆山市淀山湖镇),dzkw- s-4电热恒温水浴锅(北京市光明医疗仪器厂),蒸发光散射检测器、agilent 1100 hplc(安捷伦科技有限公司)。白附片(购于北京人卫中药饮片厂,四川产)经水提醇沉,常规脱水、干燥得到的附子粗多糖作为降解原料；其他试剂均为市售分析纯。 　　2 试验步骤 将附子粗多糖配成浓度为1%的溶液,在正交试验设定的酸浓度、温度、时间、功率下进行降解。在降解完成后,以naoh溶液中和至中性,除盐后进行分子量及其分布的测定,得出低分子量多糖(分子量低于5 000 da)在产物中所占的百分比。分子量及其分布采用高效液相色谱法测定,蒸发光散射检测器检测。 　　2.1 常态条件下的硫酸降解 以降解后的低分子量多糖含量为指标,选取酸浓度、反应温度和反应时间为因素,采用l9(34)正交表进行试验,因素水平见表1。 表1 常态条件下硫酸降解多糖因素水平表（略） 　　2.2 超声条件下的硫酸降解 以降解后低分子量多糖含量为指标,选取超声功率、反应时间、反应温度、酸浓度为因素,采用l9(34)正交表进行试验,因素水平见表2。 表2 超声条件下硫酸降解多糖因素水平表（略） 　　3 结果 　　(见表3、表4)表3 常态条件下硫酸降解的正交试验结果（略） 　　由表3的极差r值可知,影响附子多糖降解的因素顺序为b＞c＞a,常态下硫酸降解的最佳组合为b3c3a2,即：硫酸浓度为10%,温度为100 ℃,反应2 h。验证试验表明,在此条件下,产物的低分子量多糖含量为36.17%。表4 超声条件下硫酸降解的正交试验结果（略） 　　由表4的极差r值可知,影响附子多糖降解的因素顺序为a＞c＞b＞d,超声条件下硫酸降解附子多糖的最佳组合为a3c1b2d1,即：超声功率为150 w,反应时间为1 h,反应温度为40 ℃,硫酸浓度为5%。验证试验表明,在此条件下,产物的低分子量多糖含量为44.63%。 　　4 讨论 试验结果表明,常态条件下,硫酸降解附子多糖时反应温度为主要影响因素,随着温度的升高,降解产物中低分子量多糖的含量增加。而超声条件下,硫酸降解多糖时超声功率是主要影响因素。 　　由2组正交???验的结果可知,反应温度对产物中低分子量多糖得率的影响截然不同,这可能是由于常态条件下,多糖的硫酸降解主要依靠的是热效应和酸效应,而超声条件下,由于超声所产生的“空穴”效应是使多糖降解的首要因素,而温度的升高使该“空穴”效应弱化。 　　目前,在多糖降解研究中常用的方法有化学降解法、物理降解法和酶降解法等。本试验选用的是常态下的硫酸降解[2-3] 和超声条件下硫酸降解,将单纯的化学降解法与化学、物理降解[4]相结合的方法进行比较,目的是寻求能获取低分子量多糖得率较高的降解方法,从而提高多