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实验题目：糖皮质激素在应激反应中的作用 一．原理：（1）糖皮质激素主要由肾上腺皮质束状带细胞分泌。糖皮质激素主要有皮质醇（cortisol）和皮质酮（corticosterone），在人以皮质醇为主。肾上腺皮质激素主要在肝脏进行代谢，代谢产物随尿液排出体外。肝脏中存在11-HSD。11-HSD1可以使组织中活性糖皮质激素的水平增高，加强糖皮质激素的作用；而11-HSD2则降解糖皮质激素。 （2）糖皮质激素参与应激反应。机体遭遇内、外环境和社会、心理等伤害刺激时（如创伤、严重感染、高温、高寒、消耗性疾病、强烈精神刺激、精神紧张等），垂体—肾上腺皮质轴被激活，促肾上腺皮质激素（ACTH）和糖皮质激素分泌增加，出现非特异性的适应反应，称为应激反应（stress reaction）。应激反应与刺激的性质无关，任何伤害的刺激达到一定强度都可引起应激反应。 而应激反应又可以从以下几个方面调节机体的适应能力： 减少应激刺激引起的一些物质（缓激肽、蛋白水解酶及前列腺素等）的产生量及其不良作用,稳定细胞膜和溶酶体膜。 促进脂肪和蛋白质代谢，促进糖异生，使能量代放运转以糖代谢为中心，降低外周组织葡萄糖利用，维持血糖平衡，保持葡萄糖对重要器官（如脑和心）的供应； 在维持血压方面起允许作用，增强儿茶酚胺对血管的调节作用，是心肌收缩力加强，血压升高。 （3）一定强度的应激性刺激引起的应激反应是机体的适应性和防御性反应，可提高机体对伤害性刺激的耐受力；然而，强烈或持久的应激刺激引起机体过强的应激反应，对机体可造成伤害，甚至导致应激性疾病，如严重创伤、大面积烧伤、大手术等引起的应激性溃疡等。 二．目的 ：探究糖皮质激素在应激反应中的作用。 三．实验对象：大白鼠 四．验器材和药品： 哺乳动物手术器械一套，蛙板、生理盐水，烧杯、乙醚、糖皮质激素。 五．试验步骤 1.选体重、健康状况相近的小白鼠9只，分为A、B、C 三组，每组3只 2全部大白鼠置于倒扣的大烧杯中，投入一小团浸有乙醚的棉球，将其麻醉后，取俯卧位固定于蛙板上。 3.手术：将三组大白鼠的肾上腺移于皮下 方法：剪去腰部的毛，用75％酒精消毒术部皮肤。从最后胸椎处向后沿背部正中线做约2cm长的皮肤切口。先把切口牵向左侧，于最后肋骨后缘和背最长肌的外缘分离肌肉。用镊子扩大切口，以小镊子夹盐水棉球轻轻推开腹腔内脏器和组织，在肾脏前内侧脊柱下方就可看到淡黄色的肾上腺（图32-1），与其周围不规则的脂肪组织有明显区别。用外科镊子钳住肾上腺与肾之间的组织，不必结扎就可轻轻摘除腺体。同法摘除右侧肾上腺(位置稍靠前，注意勿伤附近血管)，缝合肌肉和皮肤，并涂以碘酊。 4. 三组鼠做好明显的记号。待各鼠恢复清醒和活动后，按组将A、B、C组大白鼠同时投入盛有冰水的面盆中，按动秒表，记录各动物在水中的游泳时间，直至它溺水下沉时为止。同时比较各组动物的游泳姿势与速度。各鼠下沉后立即捞出，记录并比较其恢复时间和恢复情况。 5.待各鼠恢复正常后，再将三组大白鼠进行乙醚麻醉，重复步骤2. 6.再将三组大白鼠按原手术位置打开皮肤和肌肉，将A、B两组大白鼠的两侧肾上腺均完全摘除，C组保持原样，再将三组大白鼠进行肌肉和皮肤的缝合。 7.重复步骤4. 8捞出大白鼠后，立即对A组鼠注射糖皮质激素，B、C组注射等浓度等量的生理盐水。观察各组鼠的活动情况。 9.若三组情况均良好，可再次重复步骤4???并观察各大白鼠的活动情况。 注意事项： 1.掌握麻醉深度，过浅则将乙醚棉球接近鼠口鼻，过深则移远。 2.仔细找准手术部位；避免切口过长或内脏移位、出血较多等过度损伤。 3.先做假手术后做真手术。完整摘除肾上腺，切勿直接夹取，以防止夹破腺体导致摘除不全。 4.标记要可靠、醒目并避免对鼠的伤害(如剪耳、断尾等)。 5.各鼠放于冰水中后开始下沉时应迅速取出，防止其溺水死亡。 6. 肾切除手术前：须禁食过夜。 7. 防控感染方法：用抗生素预防，在第一次手术前一天用头孢拉定(200mg/kg)灌胃预防感染；注意无菌操作，在术前要对手术器械进行充分消毒处理，保持手术区周围环境清洁，手术中对手术区消毒要充分，皮肤肌肉切口要整齐，缝合松紧适当，皮下不留过大空腔，缝合结束后用沾取苯扎溴胺溶液的棉花擦净皮毛上的血污。 思考题： 为什么选用大白鼠做实验。 为什么选用乙醚麻醉。