2.2动物细胞工程(sy)教材.ppt

;知识目标：;知识目标：;动物细胞工程的基本技术 ;　　2003年４月７日下午，12岁的四川简阳少年小林放学路上捡了些鞭炮，并把里面的火药抖出来，蹲在地上将其点燃，导致面部、四肢不幸被严重烧伤并感染，在当地医院治疗半月后，于4月22日转入武警四川消防总队医院烧伤整形科。 　　为了挽救儿子的生命，小林的爸爸、妈妈向医生恳求：“割我们的皮给儿子吧！”烧伤整形科主任魏平经不起这份亲情的重托，最终“妥协”了：同意进行这种国内极其罕见的亲体皮肤移植手术。 ;思考一下！;一、动物细胞培养 ;; 2、过程 ①取材：选取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官（分裂能力强） ②分散成单个细胞： 用胰蛋白酶(PH:8-9)或胶原蛋白酶;⑤传代细胞培养： 贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶处理后分瓶继续培养，让细胞继续增殖?? ; ;3、动物细胞培养过程的基本概念 ①细胞贴壁：细胞在培养过程中，分散的细胞贴附在瓶壁上。 ②接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖；; 细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单细胞层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。;;3、动物细胞培养过程的基本概念 ③细胞株：细胞在传代培养中，传到10代左右就不容易传下去，少数细胞度过危机可继续传下去，这些存活细胞能传40—50代，这种传代细胞叫细胞株，其遗传物质没有改变。; (1)为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？ ; (3)胰蛋白酶的作用是什么？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ 能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ ;（4）目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内，为什么？;4、动物细胞培养条件 ①无菌、无毒环境 可以培养基中加一些抗生素，以防培养过程的污染； 定期更换培养液，以便清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害；;②营养条件:水、无机盐、葡萄糖、氨基酸（作为氮源）、生长因子、维生素等； 可加血清、血浆等天然成分。; ④气体环境 95%氧气:细胞代谢所需; 5%二氧化碳:维持培养液的PH值;; 5、实际应用 ①大规模生产生物制品，如单克隆抗体; 　　②基因工程的受体细胞; 　　③培养的动物细胞用于检测有毒物质; 　　④培养正常或病变细胞，用于生理、 药理、病理研究;;获得细胞; 1、动物细胞核移植技术的概念 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成为动物个体;; 3、核移植的种类 胚胎细胞核移植:细胞分化程度低，恢复全能性容易; 体细胞核移植：细胞分化程度高，恢复全能性困难;;去核卵母细胞;卵细胞;(1)为什么体细胞核移植技术要选MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞？;讨论（过程）; A、体细胞核移植技术的成功率非常低。 B、克隆动物存在健康问题，表现出生理缺陷、遗传缺陷等。 C、克隆动物食品的安全性问题存在争议。;6、体细胞核移植技术的应用前景 ;三、动物细胞融合;三、动物细胞融合;细胞核;四、动物细胞融合;三、动物细胞融合;;四、单克隆抗体的制备;四、单克隆抗体的制备;四、单克隆抗体的制备;四、单克隆抗体的制备; 小鼠注射抗原;四、单克隆抗体的制备;四、单克隆抗体的制备;四、单克隆抗体的制备;1、动物细胞融合和植物原生质体融合比较， 在动物细胞融合中有特殊性的是（ ） A、融合的原理 B、融合的优点 C、融合的诱导手段 D、融合的过程;2、动物细胞融合的目的中最重要的是（ ） A、克服远缘杂交不亲和 B、制备单克隆抗体 C、培育新物种 D、生产杂种细胞;3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合， 得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗 体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A、经过免疫的B淋巴细胞 B、不经过免疫的T淋巴细胞 C、经过免疫的T淋巴细胞 D、不经过免疫的B淋巴细胞;4. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） ①淋巴细胞　②小鼠骨髓瘤细胞　③B淋巴细胞自身融 合细胞　④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞　 ⑤杂交瘤细胞 A． ②④ B．①③⑤　　 C． ①②③④ 　 D．②③ ;5、研究单克隆抗体