人肾小管上皮细胞蛋白质SDS-PAGE后两种银染方法的比较.pdfVIP

泸州 医 学 院学 报? ????年? 第 ??卷? 第 ?期? ????????????????????????????????? ???．?????．?? ?????? ???? 论著? 人 肾小管上皮细胞 蛋 白质 ???— ????后? 两种银染方法 的 比较 术? 张春燕 ，严冬 梅 ，杨 烨 ，龚 舒?，刘友 平? ?泸 州 医 学 院 ：生 物 化学 教 研 室 ；?医 学 分子 生物 学 实 验 室 ，四 川泸 州 ???????? 摘 要 目的 ：探 讨 适 合 于 人 肾 小 管 上 皮细 胞 蛋 白 质 ???— ????后 的银 染 方 法 。方 法 ：人 肾小 管 上皮 细 胞 株 ???一??常 规 培? 养 ．裂 解 细 胞 ，提 取 全 细 胞 蛋 白 ，???— ???? 电 泳 分 离 后 ，分 别 采 用 银 氨 法 与 改 良硝 酸 银 法 对 人 肾 小 管 上 皮 细 胞 蛋 白 质进 行 染? 色 。结 果 ：通 过 对人 肾小 管 上 皮细 胞 蛋 白质 染 色效 果 的 比 较 ，发 现 银 氨 法 凝 胶 背 景 颜 色 较 深 ，条 带 很 不清 楚 ；改 良硝 酸 银 法 凝 胶? 的 背景 干 净 ，条 带 清晰 ，且 重 复 性 好 。 结 论 ：人 肾 小管 上 皮 细 胞 蛋 白 质 ????????后 宜采 用 改 良硝 酸 银 法进 行 染 色 。? 关 键 词 银 染 ；人 肾小 管上 皮 细胞 蛋 白 ；???一聚 丙烯 酰 胺 凝胶 电泳? 中图分类号 ????? 文献标识码 ?? 文章编号 ????—???????????一???????? 人 。肾小管 上皮 细胞 蛋 白成 分 十分复 杂 ，其 表 达? ???震荡 ?????。????，????????离 心 ??，收集 的上 清? 情 况与 肾缺血再 灌 注损 伤 、急性 肾功能 衰竭 等多 种? 液 即 为蛋 白质 提取 物 。用 ????????法 测定 各 样 品的? 肾脏疾病 密切相 关 。本 实验 采用 ???一聚丙烯 酰胺 凝? 总 蛋 白含量 ，分装 ，一?????保 存 ，备用 。? 胶 电泳 ????— ?????对 人 肾小 管 上皮 细胞 蛋 白质 的? ?．?．? 电泳? 表 达情况 进行研 究 。并 比较 银 氨法 和改 良硝酸银 法? ????参 照常规 方法 操作 【??。浓缩胶 ?％，分离 胶? 的染色效 果 。以寻找 适 合人 肾 小管 上皮 细胞蛋 白质? ??％。浓 缩胶 工作 电压 ????，分离 胶工 作 电压 ????。? 的银染方法 ．为 双 向凝胶 电泳 分 析人 肾小 管上皮 细? 上样 量 为 ???／孔 。? 胞 蛋 白质组 等后 续研 究工作 奠 定基础 。? ?．?．? 银 染? 电泳 结束 后 ，整块 胶 平分 为 二 ，分别 放 人直 径? ? 材料与 方法? ????培 养皿 中 ，摇 床上 一块 胶 进行 银氨 法 染 色