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第 ??卷第 ?期? 上 海 交 通 大 学 学 报 ?农 业 科 学 版?? ???．?????．??
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文章编号 ：????—????????????—????? ???：??．????／?．????．????—????．????．??．????
人双埃克病毒 ????????????荧 光定 量 ??—????
检 测 方 法 的建 立 及 初 步应 用?
余? 莹，朱彩 霞，杨 志彪 ，袁聪 俐 ，华修 国?
???海 交通大学 农业与生物学 院，上海 ????????
摘? 要 ：为建 立一种 能快 速、简便 、灵敏 地检 测人 双 埃克病 毒 ???????????????????，??????
????????????实时荧光定量 ??????检测方法，根据 ???????发表的人双埃克病毒 ?个基 因型?
的参考毒株全序列 ，针对 ??端非编码 区保 守序列设计 ?对特异性引物 ，通过 ??????扩增此靶序?
列 ，构 建 重组质 粒作 为标 准 阳性模 板 ，经过 优化 反应 条 件 ，建 立标 准 曲线 和 融解 曲线 ，对其 灵敏 性 、?
特异性和重复性进行评价；检测临床 粪便样品共 ???份 ，并与常规套式 ??—???检 测结果进行比?
较 。结果 显 示 ，建 立的标 准 曲线? 值 与模 板 浓度 呈现 良好 的线 性 关 系 ???一?．????，融 解 曲线特?
异 ，检测灵敏度可达 ??拷 贝／??，比常规 ???检测方法 高 ???倍 ，重复性 变异 系数 小???? ?，能?
特异地检测 ????。临床样本检测结果也表 明该法?检 出??份?灵敏度高于套式 ???????检 出???
份?。实验结果证 明建立的实时荧光定量 ??????检测方法具有 良好 的特异性 、敏感性和重复性 ，?
有望成为 ?????的分子诊 断、流行病学调查等相关研
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