磁珠法[多糖多酚]植物组织基因组DNA提取试剂盒[预装版].docVIP

磁珠法·自动化：为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案 磁珠法多糖多酚植物组织基因组DNA提取试剂盒（预装版）  PAGE \* MERGEFORMAT 4  PAGE \* MERGEFORMAT 5  PAGE \* MERGEFORMAT 1 磁珠法多糖多酚植物组织基因组DNA提取试剂盒（预装版） MagBeads Polysaccharide Polyphenol Plant Genomic DNA Extraction Kit (Pre-loading Version) 【目 录 号】PTDE-P-6001 【运输条件】2~25℃； 【保存条件】试剂板、β-巯基乙醇 2~8℃；蛋白酶K -20℃； 【试剂盒组成】 Kit Component 试剂盒组成4板包装 （16T*4）24板包装 （16T*24）试 剂① PTDE-Buffer 裂解液30mL160mL② Proteinase K 蛋白酶K1.5mL8mL③ β-ME β-巯基乙醇60μL320μL④ Elute Buffer 洗脱液5mL10mL试剂板预封装试剂板4块24块耗 材磁棒套2个/包*4包2个/包*24包 【注意事项】 试剂板严禁反复冻融，以免磁珠受到损害； 试剂板中6/12号孔位洗脱液预加入量为100μL，如需要可用配套洗脱液自行增加用量； 使用前请检查裂解液是否出现结晶，如有结晶请置于65℃温浴至重新溶解完全； 蛋白酶K长期不使用，请置于-20℃保存，融化后4℃保存，并尽快使用； β-巯基乙醇易被氧化，切勿过早加入裂解液中，加入后请置于4℃保存并尽早使用完毕； 使用前请仔细阅读并按照本操作指南建议操作。 【产品简介】 本试剂盒采用针对富含多糖多酚植物组织进行杂质去除的特殊磁珠，配合高性能缓冲液体系，可从各种富含多糖多酚植物组织样本中高质量的分离纯化基因组DNA。特殊技术包埋的磁珠在特定条件下对核酸具有极强的亲和力，而当条件改变时，磁珠会释放所吸附的核酸，从而达到快速分离纯化核酸的目的。提取所得的基因组DNA产物片段大、纯度高、质量稳定可靠。使用本试剂盒纯化所得核酸产物可适用于各种常规分子生物学下游实验，如：酶切、 PCR、荧光定量PCR、文库构建、Southern杂交、芯片检测和高通量测序等。 本试剂盒提前将试剂组分预分装入96孔板，节省实验操作者加液时间，提高工作效率。试剂盒需配合磁棒法核酸提取仪使用。 【试剂盒说明】 样本类型样本量DNA提取范围各种植物组织20~100mg3~25μg【自备仪器和试剂】 英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪（或其它品牌磁棒法核酸提取仪）； 金属浴或水浴锅； 甩板离心机； EP管（2.0mL）； 离心机（EP管用）。 【仪器自动提取操作步骤】 本指南以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例，同步可完成32份样本提取工作。 试剂板准备 从试剂盒中取出独立包装预封装试剂板，颠倒数次使磁珠重悬均匀； 用甩板机离心（500rpm, 1min）使试剂及磁珠集中到孔板底部； 小心撕去铝箔封口膜，避免孔板振动，防止液体溅出。 组织样本前处理和裂解 取适量(≤100mg)植物组织样本，液氮研磨至粉末状，尽量完全转移至EP管中。加入400μL裂解液、0.8μL β-巯基乙醇和20μL蛋白酶K，涡旋振荡1~3min至混合均匀，呈云雾状。65℃温浴15min，每隔5~10min上下颠倒混匀一次。 注：1）若样本量大于100mg，但不超过400mg，需增加裂解液使用量，可按照每增加100mg组织样本增加150μL裂解液使用量，并延长裂解时间，其余试剂用量不变； 若样本个数较多，可预先将蛋白酶k、β-巯基乙醇和裂解液提前混合备用； 如需去除RNA，需在加入蛋白酶K之前额外加入5μL RNase A溶液。 试剂板上样 将裂解完毕样本室温（勿低于15℃）、13000rpm离心5min，吸取300~400μL上清液转移至试剂板的第2/8列孔位。 试剂板上机 将上样完毕的试剂板置于核酸提取仪中、插入磁棒套、打开仪器操作软件，调用“植物基因组DNA提取程序”或参照下表设置仪器参数，并运行程序。 “植物基因组DNA提取程序”各参数设置如下，如机器和说明书不一致，请以说明书为准： 步骤编号孔位运行类型振荡时间 (s)分离时间(s)挥发时间 (s)振荡幅度振荡强度一组温度(℃)二组温度(℃)三组温度(℃)四组温度(℃)11转移磁珠1505弱000022DNA结合180504中000031清洗1180505强000042DNA结合