多糖的提取和分离.ppt

一、脱脂 动物、植物、微生物胞内多糖、其细胞组织外大多有脂质包围，要使多糖释放出来，首先需要脱脂。 方法：将原材料粉碎，捣烂，加入甲醇或乙醇∶乙醚（v∶v = 1∶1）混合液，水浴加热搅拌1-3小时，过滤。 二、提取（残渣） 1、水提： 冷水、热水、沸水（评价指标：） 提取温度：50、60、70℃ 提取时间：2、4、6Hr 提取次数：1、2、3 加水量：6-10 倍体积 ; 水提醇沉法提取多糖是多糖提取中最常用的一种方法。 其原理是利用多糖溶于水(热水)后，遇乙醇能沉淀 通常的流程是将要提取的物质根据需要,加一定量的水后在合适的温度下进行水提（水浴），过滤，重复提取3次或3次以上，合并滤液，在旋转蒸发器中浓缩，离心去滤渣，然后向上清液中加三倍体积的95%的乙醇，醇沉过夜，离心收集沉淀。 还可以根据具体情况进行正交实验来优选出适合的水料比以及乙醇浓度等。;正交：（浓缩倍数） 乙醇用量：60%；70%；80%；90% 醇沉时间：3、6、12、24 hr 醇沉温度：5℃；10℃；20℃；30℃ 离心速度：4000、6000、8000、10000 （评价指标：出膏率 、多糖提取率 、综合评分 ） ;计算: 1、多糖提取率（％）＝提取物中多糖含量÷药材中多糖含量×100 2、出膏率（％）＝水提物干重÷药材重×100。 3、综合评分：根据实际情况，将多糖提取率和出膏率的权重系数分别定为0.6和0.4，采用综合评分法评价实验结果，综合评分＝多糖提取率×60％＋（100－出膏率）×40％ 4、多糖含量(%)＝标准曲线上查出样品含糖量×样品稀释总体积÷样品重×100％ ;旋转蒸发器（浓缩） 工作原理是： 在旋转蒸发浓缩提取 液时，通过真空泵抽 真空，使水的沸点降 低从提取液中蒸发出 来，这样可以在较低 的温度下达到浓缩的 目的，使多糖成分不 至于受破坏。; 2、稀酸：1%醋酸 3、稀碱：0.1-1N氢氧化钠（钾） ；几丁质的提取（5%氢氧化钠去杂） 注意问题：防止降解 （1）用稀酸提取时间宜短，温度最好不高于5℃。 （2）用稀碱提取时，常通氮气或加入硼氢化钠（钾）。 （3）稀酸、碱提取后要迅速中和、浓缩、透析与醇析。 ; 4、超声波： 超声波是频率高于20kHz的机械波，它在媒质中传播时可产生空化现象，空化中产生的极大压力造成被破碎物在瞬间破碎，另外超声波的次级效应，如机械振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速欲提取成分的扩散释放并充分与溶剂混合，利于提取。; 超声提取技术能避免高温高压对有效成分的破坏，但它对容器壁的厚薄及容器放置位置要求较高，否则会影响药材浸出效果。而且目前实验研究都是处于很小规模，要用于大规模生产，还有待于进一步解决有关工程设备的放大问题。;5、酶法： 酶反应较温和地将植物组织分解，可以较大幅度提高收率，故酶解不失为一种最大限度从植物体内提取有效成分的方法之一。这是一项很有前途的新技术 酶水解提取法常用于除去各种与多糖结合的蛋白质 ; 福建师范大学林宇野采用酶法提取银耳多糖：将银耳浆液pH调到6.3，加入1%复合酶制剂（果胶酶、纤维素酶、中性蛋白酶食品级复合酶）50℃下酶促反应40分钟，迅速升温至80℃灭活，并保温浸提1.5小时，浓缩、透析、醇沉、真空干燥。;6、中性盐溶液提取法 多糖提取主要采用热水抽提后用乙醇沉淀的方法，效果较好。 但用中性盐提取可节约成本，中性盐溶液提取法给多糖提取提供了一种选择。 ;植物多糖 多糖可存在于植物的根、茎、叶、花、果及种子中。大部分植物多糖不溶于冷水，在热水中呈粘液状，在乙醇中能沉淀。 这样从植物中分离、提取单一的植物多糖并鉴定其纯度则及为困难。故提取时需注意对一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类在用水提取前应先脱脂。而对含色素较高的根、茎、叶、果实类应进行脱色处理。 ;天麻多糖的制取： 工艺: 原料→粉碎→输送→储罐→浸出罐→压滤→预处理→分离纯化→超滤→冷冻干燥→装胶囊→产品包装→成品入库. 天麻多糖GEP-1、GEP- 2 、及GEP-3。 ;1、细胞内贮存多糖的提取和分离 当归水溶性多糖的提取和分离 2、果胶类物质的提取和分离 （1）单子叶植物细胞壁中鼠李-半乳糖醛酸聚糖的分离 （2）双子叶植物细胞壁中鼠李-半乳糖醛酸聚糖的分离 3、半纤维素的