CRISPRCas9基因组编辑技术、讲述.pptx

CRISPR/Cas9基因组编辑技术与植物基因功能研究;CRISPR/Cas9;;1987 年，Ishino 等研究大肠杆菌 iap 基因的序列和功能时发现，在该基因的 3 端非翻译区存在 5 个 高度保守的长为 29 nt 的重复序列，这些重复序列被长度为 32 nt 的非重复序列间隔开 2007 年，Barrangou 等[3]首次利用实验证明了嗜热链球菌的 CRISPR 系统直接参与细菌对噬菌体的适应性免疫反应 2012 年，Jinek 等对细菌的 II 型 CRISPR 系统进行改造和优化，成功地在体外定点切割了环状质粒 DNA 和线性寡聚核苷酸片段;CＲISPＲ-Cas 系统与细菌抵抗外源遗传物质入侵的免疫系统有关 细菌和古细菌破坏噬菌体和外源质粒的免疫保护 CＲISPＲ-Cas 系统可识别并降解外源入侵的 DNA 序列;;;CＲISPＲ 基因簇由 CＲISPＲ 序列与 Cas 蛋白的编码基因组成CＲISPＲ 序列为一系列由不同的间隔序列( spacers) 间隔的同向重复序列间隔序列来??于外源基因片段即原间隔序列;Cas 蛋白的编码基因将表达为核酸酶、解旋酶与聚合酶等； CＲISPＲ 序列则转录加工为短的 CＲISPＲ ＲNAs( crＲNAs) ，指导 Cas 蛋白与外源入侵片段的识别与降 解。 CＲISPＲ-Cas 系统介导的基因组编辑技术的基本原理，通常将 crＲNA 与 tracrＲNA 序列融合为一条引导 ＲNA 序列( single gＲNA，sgＲNA) ;CＲISPＲ-Cas9基因组编辑技术;;基因组编辑技术;4 种用于基因组编辑的的人工核酸内切酶;基因组编辑技术;ADVANTAGE;;Application of CRISPR/CasTechnology;提高打靶特异性的策略;目前，CRISPR/Cas 系统已经成功在 8 种植物中实现了定点基因组编辑，包括双子叶植物拟南芥、烟草 、甜橙 以及单子叶植物水稻 、小麦、高粱 、玉米 ，还有低等植物地钱 。