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布病实验室技的术培训.安
布病病原学及实验室诊断;布鲁氏菌病; 布病病原学及实验室检验; 发现和分类位置; 1.1 布氏菌的发现;;分类;陕西省布鲁氏菌病病原学调查分析;1.2形态和培养特征;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;1.2培养特性;1.3抵抗力;不 同 温 度 对 布 鲁 氏 菌 影响;布鲁氏菌对消毒剂的抵抗能力;不同环境中的抵抗能力; 现已证明,布鲁氏菌对四环素最敏感,其次是链霉素,而对枯草杆菌肽、多黏菌素B、多黏菌素M素等有很强的抵抗力。;布氏菌的抗原、毒力;
布氏菌的抗原成分十分复杂,存在A、M、G成分。A对牛种布氏菌有特异性,M对羊种布氏菌有特异性,G为两种菌共有。还与多种细菌存在共同抗原,因而有血清交叉反应。布氏菌不产生外毒素,只产生内毒素,有致热、致炎作用,可导致休克。;从种上来说,羊种毒力最强,猪种和牛种次之,犬种的毒力很弱,几乎不引起人致病。;由于菌种毒力等因素的不同,患病后的临床表现也不完全一样。
羊 种布鲁氏菌的毒力最强,患者中毒症状严重,多有典型的发烧、多汗、头痛、虚弱、关节痛、肝脾及睾丸肿大等急性症状。
猪种、牛种次之。
犬种的毒力很弱,几乎不引起人致病。
;布氏菌实验室检验;诊断布病的金标准。
3.1.1实验室要求
布氏菌的分离培养要在生物安全二级以上实验室中进行。
布氏菌是高致病性病原微生物,从危害程度来说为第二类病原微生物。;3.1.2方法
采样(采血)
双相培养基
菌株鉴定 (菌落形态观察、涂片、染色、镜检布氏菌诊断血清玻片凝集试验)
种型鉴定(CO2需要与否、H2S的产生的测定、染料抑菌试验、单项因子血清凝集试验、噬菌体裂解试验等等)
; 3.1.3 布氏菌培养特性
布氏菌是需氧或微需氧菌
生长缓慢,尤其初代分离
牛种部分型别、绵羊附睾种布氏菌需在5-10% CO2环境中培养
新长出的菌落无色透明,光滑圆形,突起,均质,直径1-2mm
液体培养均匀混浊,无菌膜
粗糙型菌落较大,生长快;布鲁氏菌培养材料;布鲁氏菌的培养;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;布氏菌特异的油滴样菌落;布氏琼脂布鲁氏菌菌落;血平皿 布氏菌菌落;布氏菌革兰染色;3.1.6布氏菌鉴定程序;布氏菌噬菌体;噬菌体对布氏菌的裂解;羊种布氏菌噬菌体裂解;分离培养基;布氏菌培养鉴定;双向血培养瓶;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;血清学检验; 3.2.1 血清学诊断的意义 ;3.2.2 针对布病进行的检验;虎红、平板凝集试验和皮内变态反应供初筛试验用
对已确诊的慢性病人和接种过菌苗的人,应以临床症状为主要依据,血清学试验效价高低,皮内变态反应强弱供参考;布氏菌的血清学诊断方法;3.2.2.1、虎红玻片凝集实验;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;布病虎红玻片凝集试剂;试剂与器材;注意事项;原理:布氏菌侵入机体后,就会刺激机体产生特异性抗体,这种抗体可与相应的布氏菌抗原发生特异性结合,在电解质的作用下,就会形成肉眼可见的凝集反应,也就是用已知抗原查未知抗体。;3.2.2.2、 试管凝集试验;试管凝集试验 阴性;布氏菌试管凝集 阳性;布氏菌试管凝集抗原;器材与试剂;0.2ml血清;比浊管的制备;结果判定:
根据各管中上层液体的清亮度记录凝集反??程度(滴度),特别是50%清亮度(++)对判定结果关系较大,一定要与比浊管对比判定。
++++ 液体完全透明,菌体成伞状沉淀或块状颗粒状沉淀,呈100%凝集。
+++ 液体近于完全透明,菌体成伞状沉淀,呈75%凝集。
++ 液体略微透明,菌体呈较薄伞状沉淀,呈50%凝集。
+ 液体不透明,管底有很不明显的伞状沉淀,呈25%凝集。
— 液体不透明,无伞状沉淀。
效价以产生50%凝集的血清最高稀释倍数为受检血清
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