血清蛋白质浓的度定量测定.ppt

BCA 法定量蛋白质浓度;;;【原理】：碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。;;【原理】：;基本原理;;操作步骤;;3.绘制标准曲线：;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.; 4.样品测定： 同绘制标准曲线方法，在一支试管中加入待测样品0.1mL代替标准蛋白质溶液，然后加入2.0mLBCA工作液后，立即在漩涡混合器上混合，测吸光度A，查标准曲线，求出待测样品中蛋白质浓度（g/L）。;【优缺点】 (一) 操作简单，快速，45分钟内完成测定，比经典的Lowary法快4倍且更加方便； (二) 准确灵敏，试剂稳定性好，BCA试剂的蛋白质测定范围是20-200μg/ml，微量BCA测定范围在0.5-10μg/ml。 (三) 经济实用，除试管外，测定可在微板孔中就进行，大大节约样品和试剂用量； (四) 抗试剂干扰能力比较强，如去垢剂，尿素等均无影响 ;此法测定蛋白质浓度，近些年被科研工作者广泛选用。目前BCA法的试剂盒市面有售。 ;;试剂盒组成;;;;;;;;;;;;【计算】 （一） 绘制标准曲线。 （二） 以测定管吸光度值，查找标准曲线，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。 （三） 再从标准管中选择一管与测定管光密度相接近者，求出待测血清中蛋白质浓度(g/L)。