实验十三、石蜡切片法[二]透明、透蜡、包埋.pptVIP

实验十三 石蜡切片法（二） 透明、透蜡、包埋 一、实验原理 透明 是指利用透明剂既可与脱水剂相混合又能和石蜡相混合的性质，将脱水剂替换出来，使石蜡能顺利进入材料中。 透蜡 是指将材料中的透明剂逐步清除，以至完全由石蜡充分渗透。 包埋 是把被石蜡浸透的材料连同熔化的石蜡一起倒入一定形状的容器内，并立即投入冷水中，使它凝固成含材料的蜡块，以备切片。 ? ;二、试剂与器材 1.试 剂：1/2 无水乙醇+1/2二甲苯、 二甲苯、 1/2二甲苯+1/2石蜡、 纯石蜡。 2.器 材：恒温箱、蜡杯、镊子、解剖针、 酒精灯、塑料面盆、温台。 ;三、实验程序 1．透明：透明也是渐次由低浓度至高浓度。材料先 在纯酒精和二甲苯各半的混合液浸15—30分钟，再转 入纯二甲苯中透明（至透明为止），一般15—30分钟。 2．透蜡：材料自二甲苯中取出后,先移入二甲苯和石 蜡等量的混合液中约30分钟，然后进入纯石蜡中约40 —60分钟，再换纯石蜡一次约40—60分钟。 ; 附：植物材料的透蜡过程必须缓慢进行，所须的时间 约需1-2天。其方法如下：①将材料连同二甲苯一起倒 入小蜡杯中；②然后轻轻倒入溶解的石蜡。石蜡就在二 甲苯的上层凝固起来。此时可将小蜡杯放在35-37oC温箱 内，使石蜡徐徐熔解到饱和为止，约需1-2天；③将蜡杯 移入56-60oC温箱中，待石蜡熔解后，倒去含有二甲苯的 石蜡，以后每隔1小时左右更换已熔的纯蜡一次，共换纯 蜡2-3次即可进行包埋。 ; 3．包埋：从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯，倒入包埋 用的纸盒中，取出存放材料的蜡杯，用温镊子夹取材料 平放于纸盒底部，使之排列整齐。将纸盒两侧的把手提 起，慢慢地平放在面盆的水面，待石蜡的表面凝固，将 纸盒慢慢浸入水中，待石蜡完全凝固（约30分钟）后即 可取出备用。 ;四、注意事项 透明的注意事项 使用透明剂时，要随时盖紧盖子，以免空气中水分进入； 更换透明剂，动作要迅速； 材料周围出现白色雾状，应退回纯酒精中重新脱水。 透蜡的注意事项 动物材料常用的石蜡熔点为52-56oC；植物材料为54-60oC。 透蜡温度要???定，不可忽高忽低； 包埋的注意事项 包埋前应先把必需的用具（恒温箱、温台、纸盒）准备好。 包埋用的镊子要先放在温箱中预热。 ;五、思考题 1 .当材料周围出现白色雾状时，应退回纯酒精中重 新脱水。为什么？