环境因子对栉孔扇贝血淋巴中谷胱甘肽转硫酶活性的影响.PDFVIP

环境因子对栉孔扇贝血淋巴中谷胱甘肽转硫酶活性的影响 王宜艳, 孙虎山, 周彦菊, 闫冬春, 王 磊 (鲁东大学 生命科学学院, 山东 烟台 264025) 摘要: 采用分光光度法研究了环境因子对栉孔扇贝(Chlamys farreri)血淋巴中谷胱甘肽转硫酶(GST)活 性的影响。结果表明, 血清和血细胞中都存在 GST, 且血细胞中酶活力高于血清。血细胞中 GST 的适 宜温度范围是 20～35℃ , 最适温度为 30℃ , 在 60℃时酶活力完全丧失。该酶的适宜 pH 为 7～8, 最适 pH 为 7.5。将血细胞裂解液在不同温度水浴中放置 30 min 后, GST 的热稳定性随温度的升高而降低, 35℃时的酶活力为 20℃的 22%, 显示该酶的热稳定性较差; 低温下该酶的稳定性也较差, 4℃存 12 h 后 酶活力丧失了 51%。Cu2+和 Pb2+对 GST 活力有显著抑制作用, 在 0～2.5 mg/L 质量浓度范围内, GST 活 力随 Cu2+质量浓度的升高而降低; 在 0～5 mg/L 质量浓度范围内, GST 活力随 Pb2+质量浓度的增大而下 降。 关键词: 栉孔扇贝(Chlamys farreri); 血淋巴; 谷胱甘肽转硫酶; 酶活力 中图分类号: Q959.215 文献标识码: A 文章编号: 1000-3096(2011)10-0052-05 谷胱甘肽转硫酶(Glutathione S-transferases, 1 材料与方法 GST, EC8), 也称为不含硒谷胱甘肽过氧化 物酶(nonSeGPx), 是一组多功能同功酶, 其主要功 1.1 材料和试剂 能是催化谷胱甘肽(GSH)与各种内源性和外源性有 栉孔扇贝购自烟台水产市场, 壳长 40~50 mm, 害的亲电子化合物反应, 生成无毒性或毒性小的 暂养于室内充气的砂滤海水水族箱内。还原型谷肽 GSH 硫结合物; 同时能催化有机过氧化物还原成相 胱甘肽、1-氯-2,4-二硝基苯(CDNB)等试剂均为国产 应的醇, 与硒谷胱甘肽过氧化物酶(SeGPx)协同作 分析纯产品。 [1] 用起抗氧化作用 。软体动物的双壳类、腹足类和 1.2 血清和血细胞的制备 头足类的鳃、足、外套膜和消化腺等组织中都广泛 用 5mL 注射器和 5 号针头从栉孔扇贝闭壳肌血 存在着 GSH 及其相关酶(SeGPx、GST 和谷胱甘肽 窦中抽取血淋巴, 每次实验取 5 只扇贝的血淋巴混 还原酶等 并在其抗氧化和解毒中起重要作用[2-5]。近 ), 合作为样品, 4℃、3500 r/min 离心 10 min, 取上清即 10 年来, 国外有关贝类体内 GST 的研究报道较多, 血清用于血清中 GST 活力的测定。下层沉淀即血细 多集中在重金属、杀虫剂