蛋白质与氨基酸..pptVIP

蛋白质与氨基酸;一、蛋白质的重要性和一般组成 ;（二）一般组成 ; 蛋白质水解：用H+，OH-或酶将蛋白质彻底水解，可以得到许多种氨基酸的混合物，说明氨基酸是蛋白质的基本结构单位。 ;二、蛋白质的基本结构单位——氨基酸（amino acid, aa或AA） ;2、氨基酸的分类、结构、代号 ;(2) 按侧链R基的极性;中性氨基酸;;;;;;;（二）氨基酸的构型、旋光性和光吸收 ;以丙氨酸为例：; 如含两个手性碳原子，则有４种立体异构体，分别称为Ｄ-,Ｌ-，Ｄ别-和Ｌ别-氨基酸。 ;蛋白质中的氨基酸都是L-型。 ;旋光性：;;光吸收：;;（三）氨基酸的酸碱性质和等电点 ;2、氨基酸的两性解离和等电点 ; 氨基酸在水中的两性离子既能像酸一样放出质子，也能像碱一样接受质子，氨基酸具有酸碱性质，是一类两性电解质。;不同pH时氨基酸以不同的离子化形式存在： ; 实验证明在等电点时，氨基酸主要以两性离子形式存在，但也有少量的而且数量相等的正、负离子形式，还有极少量的中性分子。 ;3．氨基酸的酸碱滴定曲线 ;;;4．等电点的计算 ;酸性氨基酸，以Asp为例：;碱性氨基酸，以Lys为例：;（四）氨基酸的化学性质 ;1．α-氨基参加的反应 ;（2）与HNO2的反应;（3）与甲醛的反应 ;;甲醛滴定要注意几点 ;（4）酰基化反应 ;Cbz-Cl;氨基酸与 5一二甲氨基萘-1-磺酰氯（dansyl chloride,DNS）的反应 ;（5）烃基化反应 ;DNFB;② 与苯异硫氰酸（酯）的反应 ;2．α-羧基参加的反应 ;酰化氨基酸;（2）成酰氯反应 ;（3）成酰胺反应 ;（4）脱羧基反应 ;（5）叠氮反应 ;3. α-氨基和α-羧基共同参加的反应 ;（2）成肽键 ;4．侧链R基参加的反应 ; 半胱氨酸的-SH很活泼，很容易在空气中重新氧化形成二硫键，一般可用卤代化物对-SH进行保护。 ;（2）苯环的黄色反应 ;（3）酚基的Millon反应（米伦氏反应） ;（4）pauly反应 ;（5）Folin一酚反应 ;（6）紫外吸收：Trp、Tyr、（phe） ;氨基酸化学性质总结 ;（五）氨基酸分析 ;（1）逆流分溶（逆流分配） ;;（2）纸层析 ;双向纸层析图 ;（3）聚酰胺薄膜层析 ;（4）薄层层析 ;2．离子交换层析法 ;离子交换树脂： ;阳离子交换树脂：活性基团是酸性的，如磺酸基-SO3H （强酸型），羧基-COOH（弱酸型） ;;茚三酮显色：仪器灵敏度10-9mol ;3．高效液相层析（high performance liguid chromatography, HPLC）;（1）反相层析（reverse phase chromatography） ;（六）氨基酸的制备 ;三、肽（peptide） ;二肽 三肽 四肽 ;氨基酸之间通过肽键连接形成的链称肽链。 ;命名：根据氨基酸组成，由N端→C端命名 ;（二）肽的理化性质 ;肽的等电点：肽所带净电荷为“零”时，溶液的pH值。 ;2．肽的化学性质 ;（三）天然存在的某些活性肽 ;2．谷胱甘肽(glutathione,GSH) ;3．多肽抗菌素 ;4．多肽激素 ;5．神经肽 ;（四）肽的人工合成;2．合成方法 ;氨基保护基Y：Cbz、Boc、Tos ;缩合剂：N，N′一二环己基碳二亚胺（N，N′-dicyclohexyl carbodiimide，缩写DCCI或DCC） ;脱去氨基保护基的方法：;;（2）固相合成法 ;;;（3）酶促合成法 ;四、蛋白质的分类 ;（二）根据组成和溶解度;(5) 组蛋白（histone）：溶于水及稀酸溶液，分子中含Arg、Lys 较多，呈（弱）碱性，如小牛胸腺组蛋白。 ;2．缀合蛋白质（conjugated protein）：也称结合蛋白质， 由蛋白质和非蛋白质两部分组成。 ;（三）根据功能 ;五、蛋白质的结构 ; 为了对蛋白质结构叙述的方便，人为地将蛋白质的结构分为一级结构、二级结??、三级结构和四级结构。 ; 随着蛋白质化学研究的进展，越来越多的人认为在二级结构和三级结构之间应加入超二级结构和结构域这两个层次，所以蛋白质的结构层次为：;（一）蛋白质的一级结构（primary structure） ;2．蛋白质一级结构的测定 ;序列测定方法 ;② 丹磺酰氯法（DNS法） ;③ 苯异硫氰酸(酯)法（PITC法、PTC法、PTH法、Edman降解法 ） ;④ 氨肽酶（aminopeptidase, Apase）法 ;亮氨酸氨肽酶（Leucine amino peptidase,