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流式细胞原理新
流式细胞仪原理
BD 生物科学
郭立琳
流式细胞术的基本概念
流式细胞术(Flow Cytometry, 简称FCM)是一 种可以快
速、准确、客观,并且同时检测单个微粒(通常是细胞)
的多项特性,并加以定量的技术,同时可以对特定群体
加以分选
研究对象为生物颗粒,如各种细胞、微生物及人工 合成
微球等
研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征,并加以定
量
BD Biosciences
Immune Function
BD Biosciences
Immune Function
BD Biosciences
Immune Function
散射光信号
Right Angle Light
Detector
α Cell Complexity
SSC
Laser FALS Sensor
Incident
Forward Light Detector
Light
α Cell Surface Area
Source
FSC
前向角散射光(FSC, Forward Scatter)
细胞相对大小及其表面积
侧向角散射光(SSC, Side Scatter)
细胞粒度及细胞内相对复杂性
BD Biosciences
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外周全血细胞散射光双参数点图
颗粒杂质、气泡
(红细胞溶解后) 对检测的影响
BD Biosciences
Immune Function
流式细胞仪的检测信号
荧光信号
? 使用荧光标记的单克隆抗体染色,做多色分析
? 荧光信号的强弱,反映了细胞抗原的表达含量
BD Biosciences
Immune Function
荧光信号
双色直接染色
BD Biosciences
Immune Function
荧光信号
BD Biosciences
Immune Function
数据分析
数据存储: LIST MODE 数据显示:
直方图 ( Histogram )
FSC SSC FL1 FL2 二维点图(Dot Plot)
Event 1 30 60 638 840 等高线图(Con tour Plo t)
Event 2 100 160 245 85
密度图 (Density)
Even
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