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流式细胞原理新.pdf

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流式细胞原理新

流式细胞仪原理 BD 生物科学 郭立琳 流式细胞术的基本概念 流式细胞术(Flow Cytometry, 简称FCM)是一 种可以快 速、准确、客观,并且同时检测单个微粒(通常是细胞) 的多项特性,并加以定量的技术,同时可以对特定群体 加以分选 研究对象为生物颗粒,如各种细胞、微生物及人工 合成 微球等 研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征,并加以定 量 BD Biosciences Immune Function BD Biosciences Immune Function BD Biosciences Immune Function 散射光信号 Right Angle Light Detector α Cell Complexity SSC Laser FALS Sensor Incident Forward Light Detector Light α Cell Surface Area Source FSC 前向角散射光(FSC, Forward Scatter) 细胞相对大小及其表面积 侧向角散射光(SSC, Side Scatter) 细胞粒度及细胞内相对复杂性 BD Biosciences Immune Function 外周全血细胞散射光双参数点图 颗粒杂质、气泡 (红细胞溶解后) 对检测的影响 BD Biosciences Immune Function 流式细胞仪的检测信号 荧光信号 ? 使用荧光标记的单克隆抗体染色,做多色分析 ? 荧光信号的强弱,反映了细胞抗原的表达含量 BD Biosciences Immune Function 荧光信号 双色直接染色 BD Biosciences Immune Function 荧光信号 BD Biosciences Immune Function 数据分析 数据存储: LIST MODE 数据显示: 直方图 ( Histogram ) FSC SSC FL1 FL2 二维点图(Dot Plot) Event 1 30 60 638 840 等高线图(Con tour Plo t) Event 2 100 160 245 85 密度图 (Density) Even

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