细胞生物学实研麻.ppt

一、实验目的 1. 熟悉并理解细胞膜选择透性这一细胞基本生理活动。 2. 了解各类物质进入细胞的速度。;二、实验原理;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;三、实验用品;（二）试剂;（三）材料;四、实验步骤;（二）低渗溶液 取试管一支加入10ml蒸馏水，然后再加入1ml稀释的鸡血，注意观察溶液的颜色变化，由不透明的红色逐渐澄清，红细胞发生破裂，造成100%红细胞溶血，使光线比较容易透过溶液。;（三）鸡红细胞的渗透性;;3.分别在下列等渗溶液中进行实验，步骤同2。;五、实验结果;六、实验报告;七、问题;;;一、 细胞培养技术;二、细胞培养定义：;3. 细胞株（cell strain）：从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群，能够繁殖50代左右，在培养过程中其特征始终保持。 4.细胞克隆(cell cloning)：从一个单一母细胞繁殖出来的细胞群体，细胞克隆方法包括：稀释铺板法、饲养层克隆法、琼脂克隆法等。;三、 细胞培养技术的基本概念（一）动物细胞培养; 群体培养（左）和克隆培养（右） ; 目前实验室中常用的几种细胞系; 动物细胞的培养步骤： ? 切取拟培养的动物器官或大组织块  洗去血污 剔除多余成分切成约1mm3大小的组织块 将所有组织剪碎用于组织培养 蛋白酶溶液消化 机械方法吹打组织块? 离心、培养液悬浮 计数、调节细胞密度 用于分离细胞培养 ?;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;细胞培养所使用的仪器：;;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;实验内容安排;一、实验目的;二、实验原理;三、实验内容;四、仪器、材料和试剂;五、实验步骤;（二）Tip和Tube的清洗;（三）洗液的配制;配制方法：;（四）消毒和灭菌;（3）干热灭菌 主要用于玻璃器皿的灭菌。将用于细胞培养的器皿放入干燥箱内，加热至160度，保温90~120min。用于RNA提取实验的用品则需要180度，保温5~8h. （4）湿热灭菌 也称高压蒸汽灭菌，是最有效的一种灭菌方法。主要应用布类、橡胶、金属器械、玻璃器皿、塑料以及加热后不发生沉淀的无机溶液。 （5）滤过灭菌 用于培养用液和各种不能高压灭菌的溶液。;（七）化学消毒法;实验五 宫颈癌HeLa细胞株培养;二、实验原理;三、仪器、材料和试剂;（二）用具、材料;（三）试剂;四、实验步骤;（二）合成培养基（RPMI 1640 ）的配制 ;;（三）小牛血清的处理;（四）生长培养基的配制;2．谷氨酰胺储备液（200mM）： ;3.饱和NaHCO3的配制;4. RPMI 1640生长培养基的配制;七、思考题：;一、实验目的;二、