不孕妇女宫颈分泌物解脲支原体检测及临床意义.docVIP

　　不孕妇女宫颈分泌物解脲支原体检测及临床意义 [关键词] 不孕症；宫颈分泌物；解脲支原体 近年来，支原体感染与不孕症的关系越来越受到人们的重视，其中主要是解脲支原体（ureaplasma urealyticum,UU）。本 研究 应用 荧光定量PCR的 方法 (FQ-PCR)对320例不孕妇女进行宫颈分泌物解脲支原体DNA检测，了解解脲支原体感染与不孕症的关系，尤其与输卵管因素不孕的关系。现将结果 分析 报告如下。 　　 1 材料与方法 　　1.1一般资料 　　2004年5月～2005年5月到我院生殖医学中心拟接受体外受精－胚胎移植助孕的不孕妇女共320例，其中原发性不孕患者136例，继发性不孕患者184例；输卵管因素不孕患者201例，非输卵管性不孕患者119例；年龄23～41岁，不孕年限2～20年。同时对60例有过正常妊娠分娩史的妇女进行检测，作为正常对照组。 　　1.2仪器与试剂 　　美国ABI PRISM 7000 Sequence Detection System 荧光定量PCR仪。解脲支原体DNA荧光定量PCR试剂盒由中山大学达安基因股份有限公司提供。 　　1.3方法 　　1.3.1 标本采集：采样时用未蘸消毒液的窥阴器扩张阴道后，先用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物，再用无菌棉拭子插入宫颈管内，停留5 s后旋转棉拭子采集宫颈分泌物，将采集宫颈分泌物的棉拭子放入无菌试管中送检。 　　1.3.2 解脲支原体DNA检测：将1 ml生理盐水加入标本试管中，充分震荡摇匀，吸取液体转至1.5 ml离心管中，12 000 rpm离心5 min。沉淀加生理盐水1 ml打匀，15 000 rpm离心5 min，再重复洗涤一次。沉淀直接加50 μl DNA提取液充分混匀，10 000 rpm离心5 min，取上清液2 μl做PCR反应。取单管单人份PCR反应管若干管，直接加入处理后样品2 μl（同时设置阴阳性质控标准品），6 000 rpm离心10 s。将各反应管放入PCR仪，进行扩增。 　　1.4 结果判断 　　样本扩增曲线与阈值线交叉点的循环数（Ct值）lt;30，判断实验结果为阳性。 　　1.5 统计学处理 　　采用χ2检验。 　 　2 结果 　　320例不孕妇女（不孕组）宫颈分泌物解脲支原体DNA检测阳性者145例，阳性率45.31%，60例正常对照组阳性者17例，阳性率28.33%，两组比较，差异有显著性(Plt;0.05)。201例输卵管因素不孕患者宫颈分泌物解脲??原体DNA检测阳性率为49.8%（100/201），119例非输卵管因素性不孕患者宫颈分泌物解脲支原体DNA检测阳性率为37.8%（45/119），两组比较，差异有显著性(Plt;0.05)。136例原发性不孕患者宫颈分泌物解脲支原体DNA检测阳性率为45.59%（62/136），184例继发性不孕患者宫颈分泌物解脲支原体DNA检测阳性率为45.11%（83/184），两组比较无显著性差异(Pgt;0.05)。 　 　3 讨论 　　支原体是一群大小介于细菌和病毒之间的原核生物,种类繁多,其中解脲支原体(UU)是引起人类泌尿生殖道感染的病原体之一。近年来的 研究 表明生殖道支原体感染与不孕不育有关[1,2]。女性不孕，尤其输卵管因素不孕与支原体感染关系密切[3]。在本资料中320例不孕妇女（不孕组）宫颈分泌物UU-DNA检出率为45.31%，明显高于正常对照组（28.33%），且输卵管因素不孕患者宫颈分泌物UU-DNA检出率（49.8%）高于非输卵管因素性不孕患者（37.8%），说明不孕妇女支原体感染率高，输卵管因素不孕与UU感染有关，与