bFGF对拟血管性痴呆小鼠学习记忆及海马5HT和DA的影响.docVIP

　　bFGF对拟血管性痴呆小鼠学习记忆及海马5HT和DA的影响 作者：曲娴 李春颖 苏畅 李冰 【摘要】 目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对拟血管性痴呆（VD）小鼠学习记忆的影响及其机制。方法 清醒小鼠反复脑缺血再灌注法建立VD动物模型；造模后给予bFGF干预 治疗 ；采用跳台法、避暗法及Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力，用荧光分光光度法检测脑组织5羟色胺(5HT)和多巴胺(DA)含量，HE染色观察病理形态学变化。结果 bFGF组小鼠学习记忆能力提高(P＜0.01)；海马5HT和DA含量增加(P＜0.05，P＜0.01)。结论 bFGF通过调节脑神经递质5HT和DA含量改善拟VD小鼠学习记忆能力。 【关键词】 碱性成纤维细胞生长因子；血管性痴呆；学习记忆；5羟色胺；多巴胺 　　有研究认为65岁以上的脑卒中幸存者中，大约1／3于发病后3个月内出现血管性痴呆（VD）〔1〕。在我国，VD可能是老年期痴呆中最常见的形式〔2〕。但其发病的确切病理机制尚不明了，临床干预手段缺乏特异性〔3〕。碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast groa公司提供。 　　1.2 动物模型制备及治疗方法 　　将动物随机分为正常组、假手术组、VD模型组（简称“模型组”），bFGF干预组（简称“bFGF组”）。参照 　　 2 结果 　　2.1 bFGF对拟VD小鼠跳台实验的影响 　　与正常组比较，假手术组小鼠学习训练和记忆测试中的各项指标相近，组间比较无显著性差异(P＞0.05)；模型组小鼠学习训练中反应期延长（Plt;0.01），错误次数增加（Plt;0.01）；记忆测试中潜伏期缩短（Plt;0.01），错误次数增加（Plt;0.01）。与模型组相比，bFGF组小鼠学习训练中反应期明显缩短（Plt;0.01），错误次数减少（Plt;0.01）；记忆测试的潜伏期延长（Plt;0.01），错误次数明显减少（Plt;0.01）。见表1。表1 bFGF对拟VD小鼠跳台实验的影响(略) 　　2.2 bFGF对拟VD小鼠避暗实验的影响 　　与正常组比较，假手术组小鼠潜伏期，错误次数无显著性差异(P＞0.05)；学习训练中，与正常组比较，模型组小鼠潜伏期延长（Plt;0.01），错误次数明显增加（Plt;0.01）；与模型组比较，bFGF组潜伏期缩短（Plt;0.01），错误次数明显减少（Plt;0.01）。在记忆测试中，与正常组比较，模型组潜伏期明显缩短、错误次数明显增多（Plt;0.01）；与模型组比较，bFGF组潜伏期明显延长，错误次数明显减少（Plt;0.01）。见表2。表2 bFGF对拟VD小鼠避暗实验的影响(略) 　　2.3 bFGF对拟VD小鼠Morris水迷宫的影响 　　定位航行实验：各组小鼠随着训练天数的增加，寻找平台的潜伏期明显缩短。但与正常组比较，假手术组小鼠寻找平台的潜伏期无显著性差异(P＞0.05)，模型组小鼠寻找平台的潜伏期显著延长（P＜0.05，P＜0.01）；与模型组小鼠比较，bFGF组小鼠寻找平台的潜伏期显著缩短（P＜0.01）。空间探索实验：与正常组比较，假手术组小鼠穿越有效区时间以及穿越平台的次数无显著性差异(P＞0.05)，模型组小鼠穿越有效区时间明显缩短（P＜0.01），穿越平台的次数减少（P＜0.01）；与模型组小鼠比较，bFGF组小鼠穿越有效区的时间延长（P＜0.05），穿过平台的次数增多（P＜0.01）。见表3。表3 bFGF对拟VD小鼠寻找平台潜伏期及空间探索实验的影响(略) 　　2.4 bFGF对拟VD小鼠DA和5HT的影响 　　与正常组比较，假手术组小鼠海马组织5HT和DA含量无显著性差异(P＞0.05)，模型组小鼠脑海马组织5HT和DA含量明显低于正常组（Plt;0.01）；bFGF组5HT和DA含量均高于模型组（Plt;0.05，Plt;0.01），见表4。表4 bFGF对拟VD小鼠海马内单胺类神经递质的影响(略) 　　2.5 海马组织CA1区HE染色观察 　　正常组：小鼠海马 CA1 区锥体细胞核大而圆，核仁明显，细胞排列较致密整齐，锥体细胞可见多层。假手术组：与正常组无明显差别。VD 模型组：小鼠海马 CA1 区锥体细胞稀疏，层次不清楚；有部分细胞缺失；有的细胞旁有空染区，出现核固缩、胞质浓染、胞体变小。bFGF组：小鼠海马组织 CA1 区锥体细胞排列尚整齐，层次尚清楚；较少见核固缩现象。 　 　3 讨论 　　脑血管病所致脑组织反复缺血再灌注和长期慢性脑灌注不足是VD的主要原因〔9〕。本实验首选采用清醒小鼠反复结扎双侧颈总动脉的方法建立VD模型。目前多用Morris水迷宫检验空间学习能力和 参考 记忆力，跳台实验和避暗实验作为