RPHPLC法测定通络止痛贴剂中胡椒碱的含量.docVIP

　　RPHPLC法测定通络止痛贴剂中胡椒碱的含量 作者：朱家校，何伟，李勇，马建春 【摘要】 目的 建立通络止痛贴剂中胡椒碱含量测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法测定。色谱柱：AkasiLC18(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相：乙腈质量分数0.1 %磷酸溶液(体积比40∶60);检测波长：343 nm;柱温：30 ℃;流速：1.0 mL/min。结果 胡椒碱在0.010 0～0.301 2 μg范围内与峰面积线性关系良好，r=0.9999，平均加样回收率为100.62 %，RSD=1.34%。结论 测定方法操作简便、准确，可用于控制通络止痛贴剂中胡椒碱的含量。 【关键词】 通络止痛贴剂;胡椒碱;反相高效液相法;含量测定 　　(Institute of Materia Medica，Guangdong Pharmaceutical College/Guangdong Provincial Key Laboratory of Advanced Drug Delivery，Guangdong Pharmaceutical College,Guangzhou,Guangdong 51006,China)Abstract:Objective To establish a determination method for piperine in Tongluo Zhitong patch. Methods Reversephase HPLC n atographic conditions L/min,UV detection ，and column temperature at 30 ℃. Results The linear range of piperine ethod is simple and accurate，and can be used for the quality control of piperine in Tongluo Zhitong patch. 　　Key ination 　　通络止痛贴片处方由荜茇、藁本、冰片等中药组成，具有疏风通络、利窍止痛的功效，临床用散剂外敷 治疗 偏头痛，疗效确切。本文根据方中药物有效成分的理化性质、药理作用及临床用药特点，将其研制成贴剂。荜茇为本品方中的君药，胡椒碱是该药的主要有效成分，因此，本文采用高效液相色谱法对制剂中胡椒碱进行了含量测定，经方法学研究，胡椒碱在所选用测定条件下能够得到较好地分离，专属性强，阴性无干扰，可作为该制剂的含量控制指标。 　　 1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　Dionex ultimate 3000高效液相色谱仪(光电二极管阵列检测器、Chromeleon色谱工作站);BS224S型 电子 分析天平(北京Sartorius公司);UV1101型紫外分光光度计(上海天美 科学 仪器有限公司);LXJⅡ离心沉淀机(上海医用分析仪器厂);KQ250E型医用超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司)。 　　1.2 试药 　　胡椒碱对照品(批号0775200203，供含量测定用，购自 中国 药品生物制品检定所);通络止痛贴剂(规格：2.5 cm×2.5 cm，批号：100325、100326、100327，广东药学院药物研究所制备);乙腈为色谱醇;其余试剂均为分析纯。 　 　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　色谱柱：AkasilC18(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相：乙腈质量分数0.1%磷酸溶液(体积比40∶60);检测波长：343 nm;柱温：30 ℃;流速：1.0 mL/min，进样量20 μL;理论塔板数按胡椒碱计应不低于5 000。 　　2.2 样品溶液的制备 　　2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取胡椒碱对照品10.04 mg，加无水乙醇溶解并定容至100 mL量瓶中，作为对照品储备液;精密吸取对照品储备液1 mL，加无水乙醇稀释并定容至10 mL，作为对照品溶液(0.010 04 mg/mL)。 　　2.2.2 供试品溶液的制备 取通络止痛贴剂1贴，除去保护层，剪碎，置干燥具塞磨口瓶中，加体积分数5%冰醋酸无水乙醇溶液25 mL，密塞，超声提取(300 in，滤过，残渣同法提取两次，合并滤液， 用无水乙醇定容至100 mL， 精密吸取2 mL，加无水乙醇定容至5 mL，摇匀， 用微孔滤膜(0.45 μm)滤过,取续滤液作为供试品溶液。 　　2.2.3 阴性对照品溶液的制备 按处方比例制备不含荜菝的阴性样品，按“2.2.2”项方法制成不含荜茇的阴性对照品溶液。 　　2.3 专属性试验 　　分别吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照品溶液各20 μL，注入高效液相色谱仪