九节茶高效液相色谱指纹图谱分离条件的优化.docVIP

　　九节茶高效液相色谱指纹图谱分离条件的优化 作者：杨方明 李卫民 高英 李永平 【摘要】 　　目的优化九节茶HPLC指纹图谱分离条件。方法使用色谱柱Kromasil C18 (250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为甲醇-0.2%磷酸溶液，柱温为25℃，流速为0.7 ml/min，检测波长为340 nm，考察九节茶的最佳梯度洗脱条件。结果经优化的分离条件为：0～35 min，甲醇由20%线性增至40%；35～65 min甲醇由40%增至60%， 65～75 min甲醇由60%减至20%，75～78 min甲醇保持20%，可使主要成分达到较好的分离。结论通过对九节茶HPLC指纹图谱分离条件的优化，更有利于控制九节茶药材的质量。 【关键词】 九节茶 高效液相色谱 指纹图谱 　　Abstract:ObjectiveTo optimize the separation conditions of fingerprint for Sarcandra Glabrous Herb by High Performance Liquid Chromatography and lay the foundation of studies on its quality control. MethodsThe samples asil C18 (250mm×4.6mm，5μm) ethanol-0.2% phosphoric acid solution as mobile phase, the detection , column temperature 25 ℃ and the flol/min. ResultsDuring the linear gradient elution program, the volume fraction of methanol in mobile phase changed as folloin, from 20% to 40%;35～65min, from 40% to 60%;65～75min, from 60% to 20%;75～78min, 20%. The separation conditions achieved good result in the separation of essential ponents.ConclusionThe method is more beneficial to control quality of Glabrous Sarcandra Herb. 　　Key atogram 　　九节茶系金粟兰科植物草珊瑚Sarcandra glabra（Thunb.）Nakai的干燥全草，又名肿节风、接骨金粟兰、草珊瑚、接骨木，为多年生常绿草本或亚灌木。九节茶味苦辛、性平、有小毒，有祛风通络、活血散淤、止血止痛、接骨续筋之功用［1］，临床应用广泛，特别是对呼吸系统、消化系统的炎症性疾患具有较高疗效，还用于骨伤科疾病及各种癌症。 　　《 中国 药典》2005年版Ⅰ部对九节茶药材的质量控制是采用HPLC测定其中异嗪皮啶的含量［2］，但是单一指标性成分的含量测定往往难以反映中药整体质量，不能较全面反映中药品质。有 　　图2b条件：0～40 min,甲醇由15%线性增至35%；40～60 min甲醇由35%增至50%，60～70 min甲醇由50%减至15%，70～72 min甲醇保持15%，进样量为10 μl，柱温为25℃，流速为0.7 ml/min。色谱图（见图2b）可以看出，色谱峰的分布有所改善，但峰与峰的分离状况不理想。　　图1 优化条件Ⅰ的HPLC图（略） 　　图2 优化条件Ⅱ的HPLC图（略） 　　2.2.3 优化条件Ⅲ 　　图3a条件：0～35 min,甲醇由17.5%线性增至40%；35～60 min甲醇由40%增至60%， 60～70min甲醇由60%减至17.5%，70～72 min甲醇保持17.5%，进样量为10 μl，柱温为25℃，流速为0.7 ml/min。其色谱图（见图3a）可以看出，色谱峰之间基本达到分离，且均匀分布在0～60 min内，但部分峰有拖尾的现象。 　　图3b条件：0～35 min,甲醇由20%线性增至40%；35～65 min甲醇由40%增至60%， 65～75 min甲醇由60%减至20%，75～78 min甲醇保持20%，进样量为10 μl，柱温为25℃，流速为0.7 ml/min。色谱图（见图3b）可以看出，无论是色谱峰的分离度、分布均匀性及峰形均与指纹图谱技术要求相符合。 　　图3 优化条件Ⅲ的HPLC图（略） 　　2.3 方法学考察为考察分析方法的可靠性，对其稳定性、仪器精密度、实