优选中药淫羊藿总黄酮含量测定方法.docVIP

　　优选中药淫羊藿总黄酮含量测定方法 作者：陈永刚 刘晓涵 林励 区计明 肖凤霞 罗穗红 【摘要】 　　[目的]比较不同测定方法对中药淫羊藿总黄酮含量测定的影响。[方法]分别采用《 中国 药典》(2005版)方法(药典法)和《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)中2种方法(检验一法和检验二法)测定。 [结果]3批淫羊藿药材中，药典法所测总黄酮含量均值为27.21g/kg，检验一法所测总黄酮含量均值为9.22g/kg，检验二法测得的总黄酮含量均值为8.21g/kg。[结论]采用保健食品检验二法测定淫羊藿总黄酮含量更为简便、合理，可考虑作为淫羊藿中黄酮类物质含量测定的首选方法。 【关键词】 淫羊藿/化学 总黄酮/分析 分光光度法 紫外线 　　淫羊藿为小檗科植物淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim.)、箭叶淫羊藿〔Epimedium sagittatum(Sieb.et Zucc)Maxim.〕、柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim.)、巫山淫羊藿(Epimedium edium koreanum Nakai)的干燥地上部分。《本草纲目》称其有益精气，坚筋骨，补腰膝，强心力之功效。各种淫羊藿均以淫羊藿苷、淫羊藿次苷及淫羊藿新苷等黄酮类成分为主[1]。 现代 药理实验研究表明[2],淫羊藿总黄酮能增加心脑血管血流量，促进造血功能、免疫功能及骨代谢，具有抗衰老、抗肿瘤等功效。 　　关于总黄酮的测定方法报道较多[3-4]，目前收载入相关国家标准的有3种方法：国家食品药品监督管理局颁布的保健食品检验与评价技术规范实施手册收载的2种方法[5](简称检验一法 和检验二法);2005版《中国药典》收录的方法(简称药典法)[6]。但关于此3法的准确性、合理性比较研究尚未见报道。本试验以淫羊藿为研究对象，以其总黄酮含量为评价指标，比较了上述3种方法对其含量测定的影响，为淫羊藿中总黄酮最佳测定方法的优选提供依据。现报道如下。 　　 1 材料 　　1.1 仪器 8453E型紫外可见分光光度计(美国 Agilent);BP211D 电子 分析天平(德国Sartorius);KQ500型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。 　　1.2 药材与试剂 淫羊藿药材(样品1批号为080602，样品2批号为080626，样品3批号为080731)购自广州致信药业有限公司，经广州中医药大学中药学院林励研究员鉴定，其原植物为小檗碱科植物淫羊藿(Epimedium brevicornum Maxim.)的干燥地上部分;淫羊藿苷对照品(批号：110737200414)、芦丁对照品(批号：100080200306)均购自中国药品生物制品检定所;聚酰胺粉(柱层析用，6080目)由浙江台州市路桥四甲生化塑料厂生产;水为双蒸水，甲醇、乙醇、苯、硝酸铝等试剂均为分析纯。 　　 2 方法与结果 　　2.1 药典法测定淫羊藿中总黄酮含量 　　2.1.1 淫羊藿苷对照品溶液的制备 取淫羊藿苷对照品，精密称定，加甲醇制成0.1mg/mL的溶液作为储备液，备用。 　　2.1.2 样品溶液的制备 取本品叶片粉末(过3号筛)约0.2g，精密称取，按 　　2.2.8 总黄酮测定 取2.2.2项下样品溶液3mL，至10mL容量瓶中，按2.2.3项下方法自各加50g/L亚硝酸钠溶液0.3mL,起，依法测定吸光度，代入回归方程， 计算 含量，结果3批药材总黄酮含量均值为9.22g/kg。结果见表4。 　　2.3 检验二法测定淫羊藿中总黄酮含量 　　2.3.1 芦丁对照品溶液的制备 精密称取经105℃干燥至恒质量的芦丁标准品5.0mg，加甲醇溶解并定容至100mL，即得0.050mg/mL芦丁标准溶液。 　　2.3.2 样品溶液的制备 取药材1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积分数95%乙醇25mL，按照