兔脑出血模型的建立及其方法比较.docVIP

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兔脑出血模型的建立及其方法比较.doc

  兔脑出血模型的建立及其方法比较 【摘要】 目的 建立稳定、可靠、重复性好的兔脑内血肿模型。 方法 利用兔不抗凝自身血注入脑基底节区形成血肿。通过高磁场强MR序列评价两种注射法(缓慢匀速注射法和快速注射法)的差异。并通过神经功能缺损评分判断血肿对机体的 影响 。 结果 MR显示缓慢匀速注射法可形成较稳定、形态规则的血肿,与快速注射法形成血肿大小比较差异有显著性(Plt;0.01)。神经功能评分可见缓慢匀速注射组得分(10.08±3.23)、快速注射组(15.32±2.48),对照组未见明显神经功能异常,前两者差异有显著性(Plt;0.05)。 结论 利用缓慢匀速注射法、不抗凝自身血注入兔脑基底节区可形成稳定、可靠、重复性好的脑内血肿模型。 【关键词】 兔 脑内血肿 磁共振 动物实验   【Abstract】 Objective To make a reproducible hemorrhage model in rabbits by injecting autologous blood sloethods by high field MR scanning. The neurologic deficit score ula intracerebral hemorrhage in gently injection . Statistics shoorrhage could be made orrhage magic resonance imaging animal experiment   临床上脑出血的发病率及病死率均较高,对其 研究 也在不断深入。脑出血除了占位效应外,血肿引起的脑水肿及继发性损伤已受到重视[1]。因此,建立稳定可靠、重复性好的脑内出血动物模型将对临床、病理研究及影像学诊断提供很大帮助。作者介绍家兔自身血缓慢匀速注射法及快速注射法制作脑出血模型,并对两种方法进行比较。   1 材料与方法   1.1 实验动物及分组   2003年12月至2005年2月采用体重2000~2500g健康家兔30只(浙江大学医学院实验动物中心提供)。随机分成三组,每组10只。分为缓慢匀速注射组、快速注射组及对照组。   1.2 模型制作方法   (1)动物麻醉及穿刺定位:常温下给予家兔2.5%戊巴比妥钠,经耳缘静脉注射麻醉。麻醉成功后动物浅感觉消失,呼吸平稳。将动物固定于立体定向仪上(江湾Ⅱ型)。颅顶部脱毛、消毒。取兔眶上切迹后方11mm水平、正中矢状线旁开4.5mm处作为基底节区穿刺点。切开皮肤分离至骨膜,颅骨钻孔。(2)穿刺、注血:①缓慢匀速注血法:用1ml针筒在兔耳正中动脉抽血共500μl(不抗凝),立即经颅顶钻孔垂直穿刺入基底节区,深度11mm。穿刺到位后2min内缓慢匀速注入250μl自体血至基底节区形成血肿,注射完成后保留穿刺针8min,以防止血液自针道反流。②快速注血法:穿刺到位后快速(半分钟以内)注入自体血以形成脑内血肿,注射完成后保留穿刺针8min,以防止血液自针道反流。③对照组:第1组5只动物只钻孔不穿刺;第2组5只动物只穿刺,但不注血。   1.3 MR扫描并测量血肿大小   采用GE Signa Horizon LX 1.5T 超导型磁共振机,相控振头线圈。扫描序列:T1 aging(T1R扫描后放血处死,取脑固定于9%甲醛24h,以针道为中心,2mm层厚切片。常规石蜡包埋、HE染色。   1.6 统计学处理   采用SPSS 10.0软件,采用方差 分析 比较两种注射法血肿大小,采用t检验分析两组兔神经功能评分差异。   2 结果   2.1 MR各序列扫描   MR各序列扫描(图1):T2*RI信号改变,其次胶原酶可能对炎性细胞有诱导作用,会影响脑血肿对周围组织损伤程度的评估。Nahls[3]等用头端带气囊的导管置入基底节制造血肿,此方法只能观察血肿占位效应,不能了解血肿周围环境变化及由于血肿本身引起的周围脑组织损伤。 家兔凝血功能很强,凝血时间约5min,利用其自身血很容易形成局部血肿。本研究利用家兔自身血注入形成脑内血肿,并比较了两种注射方法所形成血肿大小、形态的差异。其中缓慢匀速注射法较快速注射法形成血肿成功率高,且所导致的神经功能障碍症状较重,注射于基底节区也较符合人类脑内出血好发部位。利用高磁场强MR扫描评价脑内出血敏感性较高,如T2*R下观察,可以制作成稳定的脑内血肿动物模型。 【 参考

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