几株半知菌对马尾松落叶的分解--木质纤维素酶的活性动力学.pdfVIP

几株半知菌对马尾松落叶的分解1 ——木质纤维素酶的活性动力学 郝杰杰，宋福强，田兴军，黄丰，张鹏，张智俊 南京大学生命科学院，南京（210093） E-mail：tianxj@ 摘 要：应用固体发酵方法，研究了 Alternaria sp., Penicillium sp., Cephalosporium sp., Tricherderma sp., Pestalotiopsis sp.和 Aspergillus fumigatus 6 种土壤半知菌降解马尾松凋落叶 片过程中产生的漆酶（Laccase）、木质素过氧化物酶 (LiP)、锰过氧化物酶 (MnP), 羧甲基 纤维素酶 (CMCase) 和 滤纸糖酶 (FPA)的动力学变化，以及各种酶活与底物降解的关系。 结果表明：Pestalotiopsis sp. 能够产生相对较高的漆酶活性和引起底物的总有机物质（TOM） 失重最大；Alternaria sp. 产生的 MnP 酶活最高；Pestalotiopsis sp. 产生的 CMC 和 FPA 酶活 也为最高。实验中 6 种菌前期的降解速率依赖于纤维素酶 CMCase 和 FPA 酶活的高低，后 期则由木质素酶和纤维素酶协同作用来决定。依据 6 种菌的酶生产动力学变化、TOM 失重 和降解速率，可将其划分为如下两种功能类型：功能群 I 为纤维素分解菌,包括 Alternaria sp., Penicillium sp., Cephalosporium sp.和 Tricherderma sp.四种；功能群 II 为木质纤维素分解菌， 包括 Pestalotiopsis sp.和 Aspergillus fumigatus 两种。我们在实验中也发现，Pestalotiopsis sp. 产生漆酶的活性较高，是一株比较有效地降解木质纤维素底物的菌种。 关键词: 半知菌，凋落物，降解速率，木质素酶，纤维素酶 光合作用生产的 50％～60％生物量是以木质纤维素形式储存在植物的组织中(Kirk, 1983)。在自然界中，当植物体死亡或者组织凋落后，有机碳，即木质纤维素等落入土壤上 层，这些坚固的复合有机物质主要通过土壤中的微生物降解代谢，才能够再生和维持地球的 碳循环(Hammel, 1997)。用于纤维素降解的酶主要有羧甲基纤维素酶、滤纸糖酶等水解酶 (Takashima et al., 1998)。但由于纤维素通常与木质素紧密链接(Lee, 1997)，只有脱木质化后 的纤维素才能够被微生物降解(Boominathan, 1992)。在自然界的木质素降解过程中，主要的 降解酶以木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶为主(Sugiura et al., 2003)。 众所周知，白腐菌是快速降解木质素的主要菌种(Falcon et al., 1995)。但地球上碳循环 并不是单纯地归功于白腐菌，富含木质纤维素以及木质素衍生复合物的土壤中也生存着大量 的其它能够降解木质素、纤维素的微生物，特别是一些放线菌、子囊菌和半知菌，它们对地 球碳循环同样起着不可替代的作用 (Falcon et al., 1995)。Saito 等(2003)已经从不同环境地点 的土壤样品中分离到能够产生较高漆酶活性的半知菌菌株。有研究表明 Aspergillus niger 和 penicillium sp.具有显著代谢降解有毒的木质素类多环芳烃的潜能 (Thygesen et al., 2003)。目 前，国内外着眼于森林凋落物降解方面的研究基本从宏观或者底物化学成分变化两方面来进 行，关于降解过程中分解菌释放的起关键作用的木质纤维素酶报道却很少。但在降解森林凋 落物过程中，正是由于微生物产生的分解酶的作用引起底物化学成分的变化，实现凋落的分 解和养分的释放（Burns, 1978）。 我们在前期工作基础上，从马尾松林和栓皮栎林的有机凋落物层中分离到