10第十章 发酵过程的.pptVIP

第十章 发酵过程的控制;种子扩大培养;第1节 发酵过程中的代谢变化参数;1. 温度;2. 压力;3. 搅拌转速;6. 溶解氧（DO）;1. 基质浓度;2. pH;3. 脱氧核糖核酸（DNA）;1. 菌丝形态;2. 菌体干重（或菌体浓度）;3. 菌体比生长速率;4. 氧比消耗速率;5. 糖比消耗速率;第2节 温度及其控制;1、温度对发酵的影响;2、发酵热的产生（p207）;3、发酵热的测定;发酵热在发酵过程中随时间变化。 为使发酵在一定温度下进行， 措施有： 在罐夹层（即夹套）或盘管（即蛇管）内通入冷却水或冰盐水来调节； 在发酵前期或种子罐是通热水保温。 ;4、最适温度选择与发酵温度控制;4、最适温度选择与发酵温度控制—最适温度选择;4、最适温度选择与发酵温度控制—发酵温度控制;4、最适温度选择与发酵温度控制—发酵温度控制;第3节 pH的影响及其控制;1、 pH对发酵的影响;1）影响微生物的生长繁殖。 石油吃蜡酵母（解脂假丝酵母和热带假丝酵母）在 pH 3.5-5.0 范围内生长良好且不易染菌；高于5时，形态变小，发酵液变黑，发酵过程中容易被细菌污染；pH低于3时，生长受到严重的抑制，细胞极不齐整，且出现细胞自溶的情况。 ;2）影响微生物的形态。 产黄青霉细胞壁的厚度会随pH的增加而减小。 pH低于6时，菌丝长度变短，直径为2-3μm； pH 大于7时，菌丝直径为2-8 μm ，膨胀菌丝增多； pH下降后，菌丝又恢复到正常状态。;3）pH影响代谢产物形成的数量和代谢途径方向 pH不同，往往引起菌体代谢过程不同，使代谢产物的质量和比例发生改变。 如黑曲霉:在pH 2-3时发酵产生柠檬酸， 在pH近中性时，则产生草酸。 谷氨酸发酵:在中性和微碱性条件下积累谷氨酸，在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺。 酵母在酸性条件下产生乙醇，而在碱性条件下发酵产物是甘油。;4）影响产物的稳定性 如噻纳霉素的发酵中， pH值在6.7-7.5之间时，抗生素的产量相近，产品稳定性未受影响，半衰期也无变化； 但当pH大于7.5时，抗生素半衰期缩短，稳定性下降，发酵产量也减少。;5）pH在微生物培养的不同阶段有不同的影响 ;（1）pH影响酶的活性。当pH值抑制菌体某些酶的活性时使菌的新陈代谢受阻；;2、影响发酵pH的因素;1.基质代谢 ;生理碱性物质：经微生物代谢后，导致pH上升（碱性物质生成或酸性物质消耗）的物质。 如：有机氮源，硝酸盐，有机酸 （产NH3、NaOH） 生理酸性物质：经微生物代谢后，导致pH下降（酸性物质生成或碱性物质消耗）的物质。 如：糖类（产有机酸），脂肪（产脂肪酸），铵盐 （氧化产硫酸）。;2.产物形成 ;3、最适pH的选择和调节;3、最适pH的选择和调节;实际生产中，从以下几个方面进行： （1）选择适当的培养基成分和配比： 适当调整C/N比，使盐类与碳源配比平衡。 一般情况：C/N高时（真菌培养基），pH降低； C/N低时（一般细菌），经过发酵后，pH上升。 有些成分可在中间补料时补充调控。;（2）加适量缓冲剂 如碳酸钙、磷酸盐等 ①添加CaCO3最普遍 价格便宜、使用方便、效果好。 当用NH4+盐作为氮源时，可在培养基中加入CaCO3，用于中和NH4+被吸收后剩余的酸。 ②磷酸盐在生产上使用较少 价格高 磷酸浓度增高对发酵有影响;（3）直接加入酸或碱类物质 如盐酸、氢氧化钠、氨水等 ①加盐酸、氢氧化钠等强酸碱效果明显，能使pH迅速恢复正常；但同时会增加Cl-1、Na+的浓度。 ②改用氨水、尿素、乙酸等弱有机物。 ; 氨水流加法：氨水可以中和发酵中产生的酸，且NH4+可作为氮源，供给菌体营养。 通氨一般是使压缩氨气或工业用氨水(浓度20％左右)，采用少量间歇添加或连续自动流加，可避免一次加入过多造成局部偏碱。氨极易和铜反应产生毒性物质，对发酵产生影响，故需避免使用铜制的通氨设备。 ; 氨基酸发酵常用此法； 这种方法既可以达到稳定pH值的目的，又可以不断补充营养物质，特别是能产生阻遏作用的物质。少量多次补加还可解除对产物合成的阻遏作用，提高产物产量。 也就是说，采用补料的方法，可以同时实现补充营养、延长发酵周期、调节pH值和培养液的特性(如菌浓等)等几个目的。;应急措施： 改变搅拌转速或通气量，以改变溶解氧浓度，控制有机酸的积累量及其代谢速度； 改变温度，以控制微生物代谢速度； 改变罐压及通气量，降低CO2的溶解量； 改变加油或加糖量等，调节有机酸的积累量；;第4节 发酵过程中的代谢