二甲亚砜对关节软骨渗透性研究.pdfVIP

中国工程热物理学会 传热传质学 学术会议论文 编号：093134 二甲亚砜对关节软骨渗透性研究 虞效益，张绍志，徐梦洁，陈光明 浙江大学制冷与低温研究所，杭州，310027 Tel:0571 E-mail: enezsz@zju.edu.cn 摘要：玻璃化被认为是低温保存关节软骨的一种有效方法，但却受到低温保护剂渗入软骨的速率 以及低温保护剂毒性的限制。本文选用二甲亚砜(DMSO)作为低温保护剂，对其在绵羊关节软骨中的渗 -6 2 透性进行了研究，得到相应的扩散系数为 1.9-5.7×10 cm /s ，活化能为22.84kJ/mol 。认识低温保护剂 对关节软骨的渗透特性有助于建立低温保护剂加入/取出过程的数学模型，从而优化关节软骨的玻璃化 保存方案。 关键词：关节软骨 低温保存 二甲亚砜 渗透 扩散系数 0 引言 [1] 要想成功的对关节软骨进行玻璃化保存，添加低温保护剂是必要的 ，但同时也受 到低温保护剂渗入软骨的速率以及低温保护剂毒性的限制。成功的玻璃化保存软骨需要 低温保护剂能在尽可能短的时间内充分地渗入软骨，这取决于低温保护剂渗入软骨的速 率，而此速率又受到低温保护剂种类，浓度以及温度的影响。由于软骨基质是一种多孔 介质，孔径在2-6nm 之间[2] ，因此只允许小分子低温保护剂，如DMSO ，能快速地渗入 软骨内[3] ，并且在对多种低温保护剂进行比较后也证明DMSO 是一种比较理想的低温保 护剂[4,5,6] 。故本研究选用DMSO 作为低温保护剂。低温保护剂溶液浓度越高，在相同时 间内渗入软骨的低温保护剂量越多，但高浓度的低温保护剂溶液对软骨的毒性损伤也越 大；温度越高，低温保护剂渗入软骨的速率越快，但低温保护剂对软骨的毒性也随着温 度的升高而加强。因此，需要知道低温保护剂对关节软骨的渗透特性，从而优化低温保 护剂在低温保存前期的加入以及后期的取出过程。 到目前为止，已经有许多研究者在这方面做了努力，提出了各种各样的测试方法， [7,8,9] [10,11] [12,13] [14,15,16] 比如化学分析法 、重量分析法 、放射性示踪剂法 和核磁共振法 等等。 最近，Sharma 等人又提出了一种实用的新方法来测量渗入软骨的低温保护剂的量随时 间的变化关系并对此法进行了改进与完善[17,18] 。本文采取了类似的测量方法来研究1℃、 22 ℃和37℃时，对于10%(w/w)的DMSO 溶液，DMSO 在绵羊关节软骨中的渗透性。 1 材料与方法： 软骨取自于作为食用用的杭州某屠宰场的成年绵羊大腿关节处，绵羊均为母，于屠 宰后用聚乙烯膜包好置于放有冰袋的保温箱中送达实验室，整个实验自羊屠宰后24h 内 完成。用角膜环钻和手术刀从关节的负重部位切削下 126 片软骨片（直径 6mm，厚约 0.76mm，每个关节取6 片），并立即浸泡于由冰块冷却的Dulbecco’s 磷酸缓冲溶液（PBS ） 中。将软骨片随机分成3 组，每组42 片，分别用于1℃，22 ℃和37℃的渗透实验。每 基金项目：国家自然科学基金(No. 一组的渗透时间均设置为1min，2min ，5min，10min，20min ，30min 和60min，每个时 间段的软骨为6 片。 渗透时，每片软骨浸没在含有2ml10%(w/w)DMSO 的离心管中。经过指定时间之后， 取出软骨片在 PBS 中快速漂洗以除去软骨表面残留的DMSO ，并用吸水纸轻轻吸干表 面水分，然后放到含有 1mlPBS 的离心管中于4 ℃冰箱冷藏室中平衡24h 。最后得到的 DMSO/PBS 溶液用露点渗透压仪（VAPRO5520, WESCOR, USA ）测定其