复元胶囊对实验性大鼠骨关节炎软骨中TNF.docVIP

　　复元胶囊对实验性大鼠骨关节炎软骨中TNF 【摘要】 目的观察复元胶囊对实验性大鼠骨关节炎软骨中的TNF-α和VEGF的影响。方法56只SD大鼠随机分为：正常对照组6只，生理盐水灌胃；模型对照组10只，造模后生理盐水灌胃；四环素组，复元胶囊低、中、高剂量组各10只，造模后分别用四环素、复元胶囊不同剂量灌胃。 治疗 10周后分别取各组胫骨平台关节软骨，采用HE染色进行Mankin’s评分，免疫组织化学染色法测定关节软骨中的TNF-α和VEGF表达的阳性细胞数。结果正常对照组HE染色Mankin’s评分与实验组比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。各组关节软骨切片TNF-α和VEGF免疫组化染色分析，正常对照组TNF-α和VEGF与实验组比较，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论复元胶囊可能通过调控TNF-α和VEGF抑制炎症和血管增生，从而达到延缓关节软骨退行性改变的作用。 【关键词】 骨关节炎； 复元胶囊； 软骨； 肿瘤坏死因子α； 血管内皮生长因子 　　Abstract：ObjectiveTo observe the effects of FuYuan Capsule on tumor necrosis factor-alpha （TNF-α）and vascular endothelial groly divided into five groups: normal group odel contrast group oderate and high does group al group and model contrast group oved. Sections of the articular cartilage atoxylineosin.The cartilage histological changes ethod of Mankin.Immunohistochemical staining ed to investigate the expression of TNF-α and VEGF.Articular cartilage icroscope and image analysis method easure the expression intensity of TNF-α and VEGF.ResultsThere ong normal group and other groups（P＜0.05）. Immunohistochemical staining indicated that the expression intensity of TNF-α and VEGF among normal group and experimental groups mation and andangiogenesis. 　　Key or necrosis factor-alpha； Vascular endothelial groor necrosis factor-alpha，TNF-α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial grol/100 g），麻醉后纵行切开右侧后膝部内侧皮肤，切断内侧副韧带，打开关节腔，切除内侧半月板， 切断前后交叉韧带，术中避免关节面软骨人为损伤。彻底止血，逐层缝合伤口组织，无菌包扎固定。术后用青霉素8×104U·kg-1肌注7 d预防感染。术后一周每天驱赶大鼠30 m，连续10周。 　　2.2 分组造模后存活的50只SD大鼠随机分为5组：模型对照组10只；治疗组又分为低、中、高剂量组，每组各10只；四环素组10只。另外6只为正常对照组。 　　 　　2.3 给药方法 　　根据Meeh-Rutg·kg-1·d-1灌胃10周；正常组和模型组分别给予3 ml生理盐水灌胃10周。 　　2.4 标本采集及检测方法 　　于右侧胫骨平台取关节软骨，置于4%多聚甲醛固定，100 g/L乙二胺四乙酸（ethylenediamietraacetic acid, EDTA）脱钙4周，每周换液一次，4周后石蜡包埋、切片，HE染色进行Mankin’s评分，免疫组织化学法检测TNF-α和VEGF的蛋白表达。 　　2.5 图像分析 　　每个标本取5张切片，每张切片在显微镜下放大400×，随即取5个视野，采用细胞图像分析系统和医学图像分析软件，阳性强度用阳性细胞数表示。 　　2.6 统计学分析 　　用SPSS12.0软件处理，数据以±s表示，用方差分析和组间数据比较，P＜0.05有统计学意义。 　 　3 结果 　　3.1 大体观察正常对照组: 胫骨平台面呈半圆形，表面光滑，无增生迹象；实验组：右侧关节肿大，软骨表面粗糙，局部凹凸不平, 关节面糜烂，多数形成软骨溃