抗衰老片对衰老大鼠学习记忆和自由基代谢的影响.docVIP

　　抗衰老片对衰老大鼠学习记忆和自由基代谢的影响 作者：陶涛 潘永明 冷晓霞 寿旗扬 朱科燕 谢日青 杨玉伟 陈民利 【摘要】 观察抗衰老片对衰老大鼠学习记忆和脑自由基代谢的影响。［方法］取健康DA、GSHPx、Na+K+ATPase、Ca++Mg++ATPase、NO和TChE的变化。［结果］与空白对照组比，模型对照组体重增长率下降（Plt;0.01），脑组织中SOD、Na+K+ATPase、Ca++Mg++ATPase和GSHPx活力下降，MDA、NO和TChE均明显升高，水迷宫实验中探索路径和搜台潜伏期显著增加。给予不同剂量的抗衰老片、六味地黄丸和首乌延寿片后，能显著提高衰老大鼠体重的增长率，提高脑组织中SOD、Na+K+ATPase、Ca++Mg++ATPase和GSHPx活力，显著降低MDA、NO含量和TChE活性，缩短衰老大鼠在水迷宫实验的探索路径和搜台潜伏期。［结论］抗衰老片可改善衰老大鼠的学习记忆能力，增强记忆的功能，延缓自由基造成脑组织的脂质过氧化，抗衰老的作用机制可能与抑制体内脂质过氧化过程有关。 【关键词】 抗衰老片；学习记忆；自由基代谢；乙酰胆碱酯酶 Fund project：1.special research subject of TCM“Treat Predisease”in Zhejiang Province（No：2007DA），超氧化物岐化酶（SOD），谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx），一氧化氮（NO），ATP酶，乙酰胆碱酯酶（TChE）测试试剂盒均购于南京建成生物工程研究所，批号均 　　1.4 主要仪器 　　BT815A半自动生化分析仪（上海三科仪器有限公司）；FJ200组织匀浆机（上海标本模型厂）；Morris水迷宫（西班牙Panlab 公司）。 　　1.5 造模与给药 　　将大鼠购入适应性饲养1周后，观察有无异常情况，然后将大鼠称重，编号，按体重随机分组，分成7组，每组12只，雌雄各半，自由进食饮水。除空白对照组外，其余各组每天颈背部皮下注射D半乳糖生理盐水溶液，剂量为100mg/kg，连续造模49天，每天一次。从造模第1天开始给药，抗衰老片高、中、低剂量组分别灌胃给予0.60g/kg、0.30g/kg、0.15g/kg剂量的抗衰老片浸膏粉，六味地黄丸组和首乌延寿片组分别灌胃给予六味地黄丸0.68g/kg和0.525g/kg，模型对照组和空白对照组每天灌胃给予蒸馏水10ml/kg，连续给药49天。 　　1.6 观察指??? 　　1.6.1 一般观察 　　每日观察大鼠毛色、尾巴、粪便、活动情况，称取体重。 　　1.6.2 水迷宫空间行为记忆能力测试 　　采用Morris水迷宫测试。水迷宫主要由一漆成暗灰色的圆柱形水池和一金属站台组成。水池高50cm，直径80cm，站台直径10.0cm。水池上方通过一数字摄像机与 计算 机监视屏相连接。大鼠在水池中的全部活动情况可在监视屏中看到，利用计算机软件对其活动进行全程跟踪，并显示整个活动轨迹。当设定的训练时间已到或动物已爬上站台，计算机停止跟踪并记录下游泳轨迹和自动计算出动物在水池中所游过的路程，及找到站台所需的时间即潜伏期。用找到站台所需的时间表示大鼠的学习记忆能力。水池里的水面高出站台2cm，水温控制在（22±0.5）℃。实验在隔音安静的房间内进行，水池、日光灯、鼠笼等实验室各种物件的位置保持不变。实验采用一天训练2次，每次训练2min的方案。若动物2min尚未找到站台，将动物拿到站台上并使它在上面停留20秒。第3天进行水迷宫测试。 　　1.6.3 脑自由基代谢产物测定 　　取部分脑组织，用滤纸吸干水分后称重，迅速放入盛有碎冰块的小烧杯中冰浴，按体重体积比加预冷的生理盐水制备成10%的组织匀浆，3000rpm/min，离心15min，然后取组织匀浆上清再用生理盐水稀释成所需浓度，-70℃保存，待测。经考马斯亮兰测定组织蛋白，按试剂盒说明书分别测定脑组织SOD、MDA、GSHPx、NO、TChE、ATP酶活性，测定方法严格按照试剂盒说明书步骤进行。 　　1.7 统计学处理 　　 所有计量数据均表示差（x±s），采用SPSS11.0软件进行统计分析，检验方法采用One. 　　 2 结果 　　2.1 对衰老大鼠一般情况的影响 　　空白对照大鼠毛色白而光泽、耳色红润、活动自如、反应性好、饮食正常、尿液和粪便色形正常；模型对照大鼠从半乳糖皮下注射2周后即开始出现自主活动减少、行动迟缓、精神不振、嗜睡、反应不灵敏、饮食量减少、被毛卷曲、枯黄、易脱落、光泽欠佳等现象；造模4周后，尾部出现色素斑点沉着斑点，并随着时间的推移而加重；给予抗衰老片、六味地黄丸和首乌延寿片后，异常