抗风湿类药酒中糖皮质激素的测定.docVIP

　　抗风湿类药酒中糖皮质激素的测定 【摘要】 　　目的建立了用高效液相色谱（HPLC）法测定抗风湿类药酒中糖皮质激素的方法。方法采用高效液相色谱法。色谱柱为RP18 (4.6 mm×250 mm ，5 μm)柱，流动相为甲醇-水（65∶35），检测波长为245 nm。结果醋酸泼尼松在0.40～2.00 μg的范围内线性关系良好。平均回收率为99.8%，RSD为0.77% 。结论该方法简单准确，重复性好，可用于该类药酒的质量控制。 【关键词】 抗风湿类药酒；糖皮质激素；醋酸泼尼松；高效液相色谱 　　Abstract:ObjectiveTo establish an HPLC method for the determination of glucocorticoids in anti-rheumatism medicinal liquor. MethodsThe condition of HPLC m×250 mm，5 μm) ethod -obile phrase; the detection . Results The calibration cuve of prednisone acetate ethod is simple, accurate, sensitive. This study provides a test method for the quality control of similar products. 　　Key atism medicinal liquor； Glucocorticoids； Prednisone acetate； HPLC 　　抗风湿类药酒是一类 治疗 风湿性关节炎、类风湿性关节炎的药酒。不同品牌的抗风湿类药酒有不同的中药配方，主要是用青风藤、穿山龙、八角麻、乌梢蛇等各种有活血、抗炎、止痛功效的中药制成。但有些厂商为了鼓吹其产品含有名贵药材，有抗炎止痛的神奇作用，在酒中加入了如醋酸泼尼松等糖皮质激素药物，虽然这类药物有较好的抗炎止痛作用，但长期服用对身体副作用较大［1］。以醋酸泼尼松为例，本实验建立用HPLC法 测定抗风湿类药酒中糖皮质激素的方法 。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 美国odule,RP18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱；威玛色谱工作站 　　1.2 试剂二氯甲烷（AR）（北京化学试剂厂），NaCl（AR）（广州化学试剂厂）， 无水Na2SO4（AR）（广州化学试剂厂），甲醇（色谱纯）（天津市四友生物医学技有限公司），乙醇（AR）（成都科龙化工试剂厂），醋酸泼尼松标准对照品：（ 中国 药品生物制品检定所），抗风湿类药酒（市售）。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　色谱柱为RP18（4.6 mm×250 mm，5μm）；流动相为甲醇∶水（65∶35）；流速1.0 ml/min；检测波长245 nm；柱温为室温。 　　2.2 对照品及供试品溶液的制备 　　2.2.1 醋酸泼尼松对照品溶液的制备精密称取醋酸泼尼松对照品50 mg置50 ml棕色量瓶中，加甲醇至刻度，制成1 mg·ml-1的储备液，吸取储备液1 ml用乙醇定容至5 ml，此溶液每毫升含有醋酸泼尼松200 μg,作为对照品溶液。 　　2.2.2 供试品溶液的制备精密吸取药酒样品50 ml置蒸发皿中，水浴上挥净乙醇，转移入500 ml分液漏斗中，加入100 ml NaCl饱和溶液，100 ml二氯甲烷萃取，分取有机层，再用二氯甲烷50 ml萃取1次，合并有机层后，用水洗涤后过无水Na2SO4柱。用旋转浓缩蒸发器至近干。残渣用乙醇溶解定容至10 ml，过0.5 μm微孔滤膜，得供试品溶液。 　　2.2.3 标准曲线的制备精密吸取醋酸泼尼松储备液（1mg·ml-1）1.0，1.5，2.0，3.0，4.0，5.0 ml置25ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，依次进样。 　　2.3 线性关系以对照品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，将所得数据绘成标准曲线，醋酸泼尼松线性方程为：Y=7.13×105+2.84×107X，相关系数0.999 7。 　　2.4 回收率实验精密吸取50 ml已检出醋酸泼尼松的药酒样品5份，分别精密加入醋酸泼尼松对照品溶液（1 mg·ml-1）1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml，按“2.2.2供试品溶液的制备”进行操作测定， 计算 回收率。结果见表1，表明方法回收率较好。表1 回收率实验结果（略） 　　2.5 精密度实验取同一份供试品溶液，在相同条件下连续进样5次，计算醋酸泼尼松峰面积的RSD为0.78%，表明精密度良好。 　　2.6 稳定性实验取已测出醋酸泼尼松的供试品溶液1份，分别在放置暗处0，2，4，6，8 h，取10μl进