2012-9-12 减数分裂标本的制备和观察1.pdfVIP

遗传学实验 实验1：小鼠减数分裂标本的制备和观察 实验2： 性染色质标本制作和观察 实验3：PTC尝味实验 实验4：数量性状的遗传分析：人类指纹的分析 东南大学医学院 赵主江 实验一 小鼠减数分裂标本的制备和观察 实验目的 ? 了解小鼠睾丸组织减数分裂标本的制备技术 ? 掌握减数分裂过程中各期染色体的形态特征 实验原理 ? 减数分裂（Meiosis）： 是指有性生殖生物在配 子形成过程中，染色体 数目减半的细胞分裂。 Meiosis 实验原理 减数分裂过程中，DNA只复 制一次，细胞连续分裂两次，结 果形成的生殖细胞只含有单倍数 的染色体(n)，其数目是体细胞 的一半，故称为减数分裂。由于 这种分裂方式发生在生殖细胞形 成的成熟期， 故又称成熟分裂。 在减数分裂过程中，同源染 色体发生配对和分离，非同源染 色体重新组合，同时还会发生部 分同源染色体间的交换， 结果 使生殖细胞的遗传基础多样化， 既保证了后代染色体数目的稳定， 又使遗传基础发生许多新的变异。 减数分裂是生物遗传与变异的细 胞学基础。 减数分裂 实验原理 ? 哺乳动物在性成熟以后，雄 性个体精巢内的配子（精子） 分批分期相继不断地成熟。 因此，小鼠精巢进行一定技 术处理，随时都可以获得减 数分裂过程中各个时期的染 色体标本 实验方法和步骤 预固定 ? 取材 低渗 固定 制片 染色 镜检 实验方法和步骤 ? 取材： ① 性成熟小鼠处死前3小时注射秋水仙素。 ② 断髓法处死，剥离睾丸，置于盛有柠檬酸钠溶液 的培养皿中，剥去外膜散出曲细精管，更换一次 柠檬酸钠溶液。 ③ 剪碎曲细精管，置于离心管中，加9ml柠檬酸钠溶 液，打匀，静置10分钟后，取上清移入另一离心 管中，2000rpm离心3分钟 。 实验方法和步骤 ? 低渗：去上清，加8ml 37℃ KCl，吹打混匀，处理15分钟。 ? 预固定：直接加1ml固定液，吹打混匀，2000rpm离心3分钟 ， 去上清。 ? 固定：加5ml固定液，吹打混匀，静置20分钟， 2000rpm离心3 分钟 ，去上清。 ? 制片：加1ml固定液，吹打混匀，滴片、干燥 。 ? 染色：Giemsa染色8分钟 。 ? 镜检：取分散适中，染色体形态良好的分裂相观察。 实验结果 ? 取上述制片，放在显微镜的载物台上，用低倍镜找到染色体 后，再转换高倍镜进行观察。 ? 精原细胞有丝分裂中期相明确小鼠染色体数目40条 实验结果 ? 使用油镜找出减数分裂各期相，着重观察初级精母细 胞第一次减数分裂的形态变化。 ? 前期I：细线期；偶线期；粗线期；双线期；终变期。 ? 中期I：四分体排列在赤道面上； ? 后期I：同源染色体移向两极； ? 末期I ? 细线期：染色体细长并相互缠绕，其上常 见染色粒。 ? 偶线期：同源染色体联会，形态仍较细长。 ? 粗线期：每条染色体由两条染色单体