未分化型鼻咽癌中MMP.docVIP

　　未分化型鼻咽癌中MMP 作者：熊丹宁　赵勇　曾庆富　钱仲斐 　[摘要]　　目的:探讨未分化型鼻咽癌组织基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达与肿瘤淋巴结转移及预后的关系。 方法 : 应用 免疫组织化学检测46例鼻咽未分化癌病例标本MMP-9表达情况。结果:淋巴结转移组MMP-9的阳性率为82.4%(28/34),无淋巴结转移组MMP-9的阳性率为41.7%(5/12)。统计 分析 表明MMP-9的表达与淋巴结转移呈正相关（Plt;0.01）。MMP-9高表达患者的生存时间低于MMP-9低表达患者（Plt;0.05）。结论:检测未分化型鼻咽癌的MMP-9的表达可能有助于鼻咽癌的辅助诊断和预后判断。 　　[关键词]　　鼻咽癌;基质金属蛋白酶;免疫组织化学 　　Abstract:Objective To explore the relationship betatrix metalloprotEinase-9(MMP-9) and lymph node metastasis and prognosis in undifferentiated nasopharyngeal carcinoma.Methods The expression of MMP-9 in 46 cases a munohistochemistry.Results The positive rate of MMP-9 expression ph node metastasis ph node metastasis onstrated that the expression of MMP-9 ph node metastasis(plt;0.01).Survival time in patients ay be used for plementary diagnosis and prognosis prediction. 　　Key a;Matrix metalloproteinase;Immunohistochemistry 　　鼻咽癌是我国华南地区常见的恶性肿瘤之一，鼻咽癌患者的预后与肿瘤细胞的生物学行为密切相关。 目前 认为基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）在肿瘤的发生 发展 及侵袭转移过程中起着重要作用。有关基质金属蛋白酶在鼻咽癌中的表达及其与淋巴结转移和预后的关系报道甚少。本文应用免疫组化方法观察基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在鼻咽未分化癌组织的表达情况，探讨其与鼻咽癌淋巴结转移及预后的关系。 　　1　　材料与方法 　　1.1　　临床资料收集我院及外院鼻咽癌病理活检标本，经三位病 理学 专家确诊为鼻咽癌未分化型，共46例。男性29例,女性17例,平均年龄42岁。石蜡块行4 μm厚连续切片3张，1张行HE染色复查诊断，另2张行免疫组化检测。随访日期从患者手术日期 计算 ，以患者死亡时间终止。对照组为鼻炎慢性炎症28例。 　　1.2　　免疫组织化学染色采用SP法，DAB染色。即用型鼠抗人MMP-9单克隆抗体、超敏SP（鼠）免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒均购自福州迈新生物公司。具体染色步骤参照说明书进行，用PBS代替一抗作阴性对照，用已知阳性片作阳性对照。按着色范围及强度判断结果。主要步骤简述如下：常规脱蜡、水化，3%双氧水去除内源性过氧化物酶，枸橼酸盐缓冲液行微波抗原修复，正常羊血清封闭，滴加MMP-9单克隆抗体后4 ℃过夜；滴加生物素标记的二抗IgG，室温10 min，滴加链霉亲和素-过氧化物酶10 min，DAB染色，苏木精对比染色，中性树胶封固。 　　1.3　　结果判断标准以细胞浆和/或细胞膜出现棕黄色颗粒、染色强度高于背景非特异性染色者为阳性。每张切片随机选取10个高倍视野，每个视野计数100个细胞，观察阳性细胞染色强度，计数阳性细胞百分数。按着色细胞百分数记分：着色细胞lt;10%为0分；10%～40%为1分；40%～70%为2分； ≥70%为3分。按着色强度积分：无着色为0分；淡黄色为1分；棕黄色为2分。将着色细胞百分数记分与着色强度记分相乘,总记分0分为阴性(-);1～3分为弱阳性（＋）；４分以上为强阳性（＋＋）。 　　1.4　　统计学处理采用t检验。 　　2　　结果 　　2.1　　鼻咽癌组织中MMP-9的表达MMP-9在癌旁正常鼻咽粘膜上皮低水平表达，MMP-9阳性表达定位于癌细胞胞质和／或胞膜 。46例鼻咽癌中MMP-9总阳性率71.7%(33/46),其中弱阳性28.3%(13/46),强阳性43.5%(20/46)。 　　2.2　　MMP-9的表达与淋巴结转移的关系 淋巴结转移组MMP-9的阳性率为82.4%(28/34),无淋巴结转移组MMP-9的阳性率为41.7