化学药品对照品标定方法.doc

化学药品对照品标定方法（第一稿） 2013-03-01（ZCXH） 概述： 对照品含量标定方法需要至少两种经方法学验证方法进行标定。并采用两种以上不同分离机理或不同色谱条件并经验证的色谱方法相互验证比较，同时采用二极管阵列检测器检测HPLC法的色谱峰纯度（如果无合适的另一种方法，就采用不同仪器分别进行测定），而后根据测定结果经统计分析确定对照品（标准品）的纯度。色谱法确定纯度后扣除有关物质、炽灼残渣、水分和残留溶剂等后的理论含量确定为标准品含量。 对照品含量技术要求： 对照品含量要求：（必须高于原料纯度） 主成分对照品含量要求：含量一般不低于99.5%（折干后） 杂质对照品含量要求：含量一般不低于95.0%（折干后） 色谱法测定纯度时要求 供试品浓度要求：分析方法有关物质项下浓度。 检测波长选择：首选有关物质项下条件，同时结合DAD结果查看多个波长项下（可分别选各个杂质最大吸收波长）结果，以平均值计算结果（杂质对照品小于5%以内，含量对照品小于1%以内）。 流动相选择：首选有关物质项下条件，如果出峰时间过短（小于5min）可适当调节色谱条件，以延长其保留时间考察。 色谱法测定纯度具体流程 具有法定标准对照品标定： 进样精密度考察：法定对照品6针。 法定对照品：双样双针。 工作对照品：双样双针。 干燥失重：测定后扣除。 用于批准生产时，正式的标准流程见附件1 无法定标准对照品标定： 对照品：在两台不同仪器上分别进行测定，6样6针，（其6针峰面积RSD应不大于0.85%），以二者平均值计算纯度。 干燥失重：测定后，从供试品纯度中进行扣除。 炽灼残渣：测定后，从供试品纯度中进行扣除。 杂质对照品标定： 对照品：在1台不同仪器上分别进行测定，6样6针。 干燥失重：测定后，从供试品纯度中进行扣除。（自制，量较大时采用） 申报时需要形成的文件 验证报告包括：一是总体情况说明：包括对照品理化性质、合成或生产工艺路线及纯化方法、贮藏和制备量等情况；二是结构确证：包括质谱（MS）、核磁（NMR）、紫外（UV）、熔点、元素分析或高分辨率、薄层（TLC）或高效液相（HPLC）、X粉末衍射、红外（IR）等；三是纯度标定：不同含量测定方法测定、水分测定、残留溶剂测定（或干燥失重测定）、炽灼残渣测定等；四是提供分析报告（COA）。（详细见附件2） 提供对照品质量标准 对照品纯度标定 含量—色谱法 色谱纯度 照本品有关物质测定方法测定，采用面积归一法，计算对照品主峰的面积含量。实验结果见表。 表1 对照品色谱纯度结果 样品123456平均值色谱纯度（%）RSD（%）含量—滴定法（或其他方法） 照电位滴定法（药典版二部附录 = 7 \* ROMAN \* MERGEFORMAT VIIA），用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定，6分供试品进行测定，并将滴定结果用空白试验校正，计算滴定度（采用四位有效数字）。 表2 对照品滴定测定结果 样品123456平均值含量（%）RSD（%）其他检验项目（说明1,2,3选择1,2或选择3检测数据即可） 有机溶剂残留 照本品有机溶剂残留法进行测定（药典附录残留溶剂测定法 = 8 \* ROMAN \* MERGEFORMAT VIIIP），采用外标法进行测定时，配制6个样品，或采用两种不同的内标物按内标法测定。 表3 对照品有机溶剂残留测定结果 样品123456平均值有机溶剂含量（%）RSD（%）水分测定 取本品，照水分测定法（药典附录 = 8 \* ROMAN \* MERGEFORMAT VIIIM第一法A）进行测定，供试品6份进行测定，根据水分含量平均值进行计算。 表4 对照品水分测定结果 样品123456平均值水分（%）RSD（%）干燥失重 取本品，照干燥失重法（药典附录 = 8 \* ROMAN \* MERGEFORMAT VIIIL）干燥至恒重，供试品2份，计算干燥失重平均结果。 表5 对照品干燥失重结果 样品12平均干燥失重（%）炽灼残渣 取本品原料，照炽灼残渣测定法（药典附录 = 8 \* ROMAN \* MERGEFORMAT VIIIN）测定，根据多批供试品测定平均值计算结果。 表6 炽灼残渣检查结果 批号干燥失重（%）计算公式： 湿品含量=色谱纯度-干燥失重-炽灼残渣（大于98.5%） [或写成含量=色谱纯度*（1-残留溶剂%-水分%-残渣%）] 干品含量=湿品含量/(1-干燥失重)*100%。（限度应为99.0-101.0%） 参考文献： Spiraeoside