浙江大学大学化学实验O课件7.pdf

柱色谱 一、实验目的： 1.了解柱色谱分离混合物的原理及其用途 2.掌握柱色谱的实验操作技术 二、基本原理 色谱法分离有机化合物是利用混合物 各组分在某一物质中的吸附或溶解性能 （分配）的不同，或亲和性能的差异，使 混合物的各组分随着流动的液体或气体 （称流动相），通过另一种固定不动的固 体或液体（称固定相），进行反复的吸附 或分配作用，从而使各组分分离。根据操 作条件不同，可以分为柱色谱、薄层色谱、 纸色谱等。 如将硅胶或Al O 等吸附剂（固定 如将硅胶或Al O 等吸附剂（固定 2 3 2 3 相）装入玻璃管中（如图1)，从 相）装入玻璃管中（如图1)，从 柱顶加入样品 (A, B)，再从柱顶 柱顶加入样品 (A, B)，再从柱顶 加入淋洗 剂（流动相）（图2 ）。 加入淋洗 剂（流动相）（图2 ）。 石英砂 石英砂 样品 样品 吸附剂 A、B两组分随流动相的流动而吸附剂 A、B两组分随流动相的流动而 物质A 物质A 向下移动。A、B在两相不断进 向下移动。A、B在两相不断进 行着的溶解、吸附、再溶解、 行着的溶解、吸附、再溶解、 物质B 物质B 再吸附过程中，由于吸附能力 再吸附过程中，由于吸附能力 的差异，不同组份随流动相移 的差异，不同组份随流动相移 动的速度不同，从而达到分离 动的速度不同，从而达到分离 （1） （2 ） （3 ） （图3）。 （1） （2 ） （3 ） （图3）。 吸附剂吸附有机化合物的能力与化合物 的结构有关，分子的极性越小，吸附能力越 弱。分子的极性越大，吸附能力越强。吸附 能力最弱的组分最先随淋洗剂流出，分别收 集各组分。若待纯化物质是有色物质，则在 柱上可以直接看到色带，若是无色物质，可 用薄层色谱鉴定。 分离效果主要处决于化合物的结构，吸附 剂的性质及淋洗剂的极性。 1.吸附剂 选择的吸附剂绝不能与待分离的物质及淋洗剂发 生化学反应。常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、氧化镁、 碳酸钙和活性炭等。有机实验室用的最多的为硅胶。 吸附能力与吸附剂的颗粒大小有关。颗粒越小， 表面积越大，吸附能力越高，分离效果好，但淋洗剂 的流速太慢。反之则反。 用于柱色谱的硅胶一般为100-200目，200-300 目，300-400目及400目以上。 2.溶质的结构和吸附能力 化合物的吸附性和它们的极性成正 比，化合物分子中含有极性较大的基团 其吸附性较强。氧化铝对各种化合物的 吸附性按下列顺序递减。 酸、碱 醇、胺、硫醇 酯、醛、酮 芳香族化合物 卤代物、醚 烯 饱和烃。 3.淋洗剂 试样吸附在氧化铝柱上后，用合适的溶剂 进行洗脱，这种溶剂称为淋洗剂。洗脱剂的极 性不能过大（将被分离物全部洗脱，起不到分 离效果）或过小（各组分仍被吸附留在固定 相），常用洗脱溶剂的极性按以下次序递增: 己烷、石油醚＜环已烷＜四氯化碳＜三氯 乙烯＜二硫化碳＜甲苯＜苯＜二氯甲烷＜三氯 甲烷＜乙醚＜乙酸乙酯＜