睾丸扭转对大鼠生精能力的影响及维拉帕米的保护作用.docVIP

　　睾丸扭转对大鼠生精能力的影响及维拉帕米的保护作用 【摘要】 目的:探讨钙离子通道拮抗剂(维拉帕米,verapamil)对大鼠睾丸扭转复位后睾丸细胞损伤的保护作用。 方法 :选用出生1个月左右的健康雄性ＳＤ大鼠30只,随机平均分成3组，手术制作幼鼠睾丸扭转模型（720°,2h）。对部分扭转组 应用 生理盐水或钙离子通道拮抗剂(维拉帕米)。术后6个月处死,取两侧睾丸标本，测定睾丸NO含量、NOS活性，并制备细胞悬液，检测记录每样本中单倍体细胞占细胞总数百分比。结果:B组（扭转组）单倍体细胞占细胞总数明显下降，而且睾丸组织NO含量、NOS活性升高，维拉帕米可减轻上述变化。结论:维拉帕米可以提高睾丸组织单倍体细胞的百分比，在一定程度上可以减轻睾丸组织损伤，对睾丸的生精能力有明显的保护作用。 .L.编辑。 【关键词】 睾丸扭转;维拉帕米;流式细胞术;一氧化氮 【ABSTRACT】 Objective:To investigate the protective effect of verapamil on the testis after testicular torsion in rats. Methods: 30 healthy male SpragueDanley rats(onemonthold) ly divided equally into three groups. A model of testicular torsion (720 degree, 2hours) al saline or Ca2+ channal blocker(verapamil) inistrated in the intervention groups. Six months laters, nitric oxide (NO), nitric oxide synthase activity (NOS) easured in both testis of the rats. And the DNA content easured by floetry, the percentage of monoploid ore in the torsive side; The percentage of monoploid significantly decreased in the B group(testicular torsion) ,verapamil could reduce the extent of these changes. Conclusion: The verapamil could raise the percentage of monoploid in testis and reduce the extent of damages. 【KEY edimachine及其配套产品制成单细胞悬液。用PBS分别洗涤三次标本，弃去上清液，用PBS调整细胞浓度到1.0×106细胞/ml。①分别取100μl样本，加入CycleTest TM Plus DNA试剂盒A液250μl，轻轻摇匀不要震荡，室温静置10min，②分别加入200μl B液，轻轻摇匀不要震荡，室温静置10min，③分别加入200μl C液，轻轻摇匀不要震荡，低温（2～8℃）避光静置10min。加入C液2h内用流式细胞仪（FACScalibur)Cellquest软件测定。用ModFITLT for mac v3.0软件分别进行数据 分析 ,记录每样本中单倍体细胞占细胞总数百分比。 1.3 统计学分析 按组别对流式细胞仪检测结果予以方差分析,各组结果两两比较,所有结果以SPSS统计软件包处理。 2 结果 2.1 维拉帕米对睾丸扭转NO含量及NOS活性 影响 B组NO含量、NOS活性，扭转侧和对侧分别与正常对照组比较，NO含量、NOS活性均显著升高（P＜0.05）；扭转侧较对侧变化显著（P＜0.05）。C组与B组扭转侧和对侧分别比较，NO含量、NOS活性均降低（P＜0.05）(表1)。 2.2 维拉帕米对睾丸扭转单倍体细胞的作用 表1 各组NO含量、NOS活性比较注：*P＜0.05，**P＜0.01，vs control；△P＜0.05，vs B组对侧;#P＜0.05，vs B组扭转；+P＜0.05，vs B组对侧。 A组、B组和C组单倍体细胞分别占细胞总数的(72.9±1.9)%、(50.6±2.2)%、和(68.1±1.6)%。各组结果两两比较,统计学上差异均有显著性意义,说明青春期前睾丸扭转影响大鼠性成熟后的生精能力,钙通道拮抗剂(维拉帕米)在一定程度上可以减轻组织损伤。 3 讨论 正常睾丸组织有防御氧自由基损伤的机制