第十一章基因转录与加工.ppt

转录的概念和DNA的模板链和编码链 DNA合成（复制）和RNA合成（转录）的比较 ①. 起始位点的识别：σ识别正确的启动位点(启动子——一段保守DNA序列位于基因上游，是RNA聚合酶结合并开始转录的位置，-35区、-10区、+1)并形成复合物,使局部DNA结构松散，打开17bp暴露出DNA模板链，有利于RNA聚合酶进入转录泡 RNA链的延伸图解 ④. 转录终止：终止子和ρ因子 终止子：具有一段富含G-C的回文区域，转录生成的RNA链可形成发夹结构，影响RNA聚合酶的行进使转录终止 ρ因子：当RNA聚合酶移动至终止子部位时，ρ因子与其结合使RNA和DNA分离，转录终止 RNA合成过程 大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图 RNA聚合酶催化的反应 原核生物酶合成的诱导调节的遗传机制操纵子学说 乳糖操纵子的负调控 乳糖操纵子的正调控 原核生物中rRNA前体的加工 真核生物和原核生物转录的差别 真核细胞mRNA的加工 真核细胞mRNA的加工 真核细胞mRNA的加工 真核细胞mRNA的加工 * 1、本章简介 2、掌握内容讲述 3、要点回顾 4、本章习题 本章介绍了基因表达的转录过程及调节机制、转录产物的加工。重点掌握转录（生成RNA）的机制、乳糖操纵子结构及其活性调节、mRNA的转录后加工。 11.1 基本概念 11.2 原核生物基因转录 11.3 真核生物基因转录 11.4 真核生物基因转录调节 11.1 基本概念 一、分子遗传学的中心法则 基因表达、复制与转录的比较 二、转录过程：起始（识别起始 位点和开始）、延长、终止 三、原核生物RNA聚合酶 基因表达包括转录和翻译两个过程，转录的起始是基因表达的第一步，也是基因表达调节的主要控制点 转录的概念 翻译：由RNA指导蛋白质的合成过程 转录是在DNA的指导下的RNA聚合酶的催化下，按照碱基配对的原则，以四种NTP为原料合成一条与模板DNA互补的RNA的过程。RNA的转录从DNA模板的特定位点开始，并在一定的位点终止。此转录区域为一个转录单位。 启动子 终止子 模板链/无义链 编码链/有义链/非模板链 非信息区 DNA 5′ 5′ 3′ 3′ 3’ 5’ +1 转录起始点 AACTGT ATATTA TTGACA TATAAT 3’ 5’ －35序列 Sextama 框 －10序列 Pribnow框，核心酶结合位点 -35 -10 pppG或pppA 5‘ 5‘ 3‘ 3‘ 模板链 E ? ③.链的延长：以NTP为原料和能量,DNA模板链为模板，靠核心酶的催化，核苷酸间通过3′,5′-磷酸二酯键形成核糖核酸链(RNA) ②. 转录起始：转录起始不需要引物，加入的第一个核苷三磷酸常是GTP或ATP。所形成的启动子、全酶和核苷三磷酸复合物称为三元起始复合物，第一个核苷三磷酸一旦掺入到转录起始点，σ亚基就会被释放脱离核心酶。 3′ 5′ RNA-DNA杂交螺旋 聚合酶的移动方向3′→5′ 新生RNA 复链 解链 有义链/编码链 模板链（无义链） 延长部位 起始 双链DNA局部解开 磷酸二酯键形成 终止阶段 解链区到达基因终点 延长阶段 5? 3? ? ? RNA 启动子 终止子 5? ? RNA核心酶 ? 5? ? 3? 5? ? 3? 5? 5? 3? ? 离开 ? ? ? ? ?? 核心酶(α2ββ?) 起始因子 β?——和模板DNA结合 β——与底物结合催化聚合反应 α——与转录频率相关 全酶(α2ββ??) RNA聚合酶缺乏3′→5′外切酶活性因此无校对功能 A C G A C G U U 模板DNA 5′ 3′ 5′ 3′ 新合成RNA 合成方向 3′ 5′-磷酸二酯键 11.2 原核生物基因转录 转录单位 一、E.coli乳糖操纵子 结构、活性调节 二、转录产物的加工 结构基因：可转录为RNA的一段DNA序列 通常在几个结构基因上游有一个控制部位，调节着结构基因的转录速率 控制部位和结构基因组成操纵子 结构基因不止一个时称为多顺反子操纵子 终止子：结构基因末端包含终止信号的DNA序列 结构基因、控制部位、终止子共同组成转录单位 操纵子——基因表达的协同单位 乳糖操纵子 结构基因（编码蛋白质，S） 控制部位 CAP蛋白结合位点（CRP） 启动子（premotor, P） 调节基因（调节/阻遏蛋白，I） 操纵基因（operator, O） 调节基因 操纵基因 乳糖结构基因 P LacZ LacY Laca mRNA 阻遏/调节蛋白（有活性） 基 因 关 闭 启动子 O I P LacZ LacY Laca