【2017年整理】多聚赖氨酸修饰γ-Fe2O3纳米颗粒标记不影响神经母细胞瘤干细胞的活化和增殖.doc

多聚赖氨酸修饰γ-Fe2O3纳米颗粒标记不影响神经母细胞瘤 干细胞的活化和增殖 仲智勇，时保军，周 辉，王文博(河北医科大学第二医院小儿外科，河北省石家庄市 050017) 引用本文：仲智勇，时保军，周辉，王文博. 多聚赖氨酸修饰γ-Fe2O3纳米颗粒标记不影响神经母细胞瘤干细胞的活化和增殖[J].中国组织工程研究，2016，20(10):1419-1425. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.10.007 ORCID: 0000-0001-9950-0495 (仲智勇) 文章快速阅读： 文题释义： 纳米颗粒：纳米颗粒是一种人工制造的、大小不超过100 nm的微型颗粒，可以为乳胶体、聚合物、陶瓷颗粒、金属颗粒和碳颗粒，纳米颗粒能够渗透到膜细胞中，并沿神经细胞突触、血管和淋巴血管传播，纳米颗粒有选择性地积累在不同的细胞和一定的细胞结构中，为药物的使用提供了有效性。 巢蛋白：归为第Ⅳ类中间丝蛋白，分布在细胞浆内，参与细胞骨架的构成。巢蛋白表达起始于胚胎早期神经前体细胞，在胚胎脑中呈时空序列性表达，目前主要作为神经干细胞的标记蛋白，应用于神经干细胞的分离、鉴定和培养。Nestin在中枢神经损伤后能重新表达，可作为中枢神经系统损伤的早期、快速应答的敏感指标。 摘要 背景：维甲酸是最有潜力的神经母细胞瘤微小残留病灶的诱导剂，能诱导体内细胞分化，同时伴有肿瘤细胞增殖减低。 目的：探讨纳米颗粒标记对神经母细胞瘤干细胞生物学特性的影响以及13-顺维甲酸对神经母细胞瘤干细胞的诱导分化作用。 方法：采用无血清悬浮培养法体外分离培养神经母细胞瘤干细胞，多聚赖氨酸修饰γ-Fe2O3纳米颗粒标记神经母细胞瘤干细胞，在含有13-顺维甲酸的培养液中诱导分化培养，RT-PCR法检测标记前后和诱导前后Oct-4的表达变化，用细胞免疫荧光法观察标记前后和诱导前后nestin的表达变化。 结果与结论：①20例患者的骨髓标本中有5例成功培养出神经母细胞瘤干细胞。②多聚赖氨酸修饰γ-Fe2O3纳米颗粒标记不影响神经母细胞瘤干细胞的活性和增殖能力，Oct-4 mRNA表达和nestin表达也没有明显变化。③加入13-顺维甲酸培养后，细胞形态发生变化，生长速度减慢，Oct-4 mRNA表达和nestin表达逐渐降低。④结果表明多聚赖氨酸修饰γ-Fe2O3纳米颗粒可以用于标记神经母细胞瘤干细胞，13-顺维甲酸可以诱导神经母细胞瘤干细胞分化。 关键词： 干细胞；肿瘤干细胞；神经母细胞瘤；γ-Fe2O3；纳米颗粒；13-顺维甲酸；肿瘤干细胞；细胞分化 主题词： 肿瘤干细胞；神经母细胞瘤；维甲酸；组织工程 基金资助： 河北省2013年医学科学研究课题计划 Polylysine-modified gamma-Fe2O3 nanoparticle labeling has no effect on neuroblastoma stem cell activation and proliferation Zhong Zhi-yong, Shi Bao-jun, Zhou Hui, Wang Wen-bo (Department of Pediatric Surgery, Second Affiliated Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, Hebei Province, China) Abstract BACKGROUND: Retinoic acid is the most promising inducer for neuroblastoma minimal residual lesion, and it can induce cell differentiation in vivo, accompanied by reducing tumor cell proliferation. OBJECTIVE: To study the effect of nanoparticle labeling on biological characteristics of neuroblastoma stem cells, and the role of 13-cis retinoic acid to induce differentiation of neuroblastoma stem cells. METHODS: Neuroblastoma stem cells were isolated and cultured in vitro using serum-fr