螺旋藻对衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用.docVIP

　　螺旋藻对衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用 【摘要】 目的 探讨螺旋藻对D半乳糖所致衰老小鼠学习、记忆障碍的改善作用。方法 使用D半乳糖建立小鼠衰老模型，用螺旋藻灌胃进行实验性 治疗 。持续6 g/kg剂量颈部皮下注射D半乳糖，同时用等量的蒸馏水灌胃；低剂量组：按上述剂量颈部皮下注射D半乳糖，同时用1.5 g/kg剂量的螺旋藻灌胃；高剂量组：按上述剂量颈部皮下注射D半乳糖，同时用3 g/kg剂量的螺旋藻灌胃；对照组：按上述同样剂量的蒸馏水分别颈部皮下注射和灌胃。各组动物正常进食，持续6 in内的错误次数即小鼠进入暗箱的次数,以此作为学习成绩。24 h后再测，以其错误次数和潜伏期(即第一次进入暗箱的时间)作为记忆成绩。 　　1.4 Morris水迷宫实验 Morris水迷宫由圆形水槽、有机玻璃平台、摄像系统和电脑分析系统组成。训练时水温保持在25℃左右，将小鼠面向池壁从4个不同象限入水，每只小鼠每日训练4次，小鼠从入水到找到平台所需的时间称为潜伏期。找到后在平台上应保持20 s，如果60 s还未找到，则应将其引导到平台上，潜伏期按60 s计。连续4 d进行定向航行实验，记录第4天每只小鼠潜伏期的平均值。第5天进行空间探索实验，即在撤掉平台时，记录120 s内小鼠穿越平台的次数。 　　1.5 小鼠脑组织MAO和GSHPx活性的测定 行为测试完成后，将小鼠颈椎拉断处死，迅速断头取脑、称重。按照试剂盒说明书，检测脑组织MAO和GSHPx活性。 　　1.6 统计学分析 数据用x±s表示，采用SPSS12.0软件对数据进行统计学处理。 　 　2 结果 　　2.1 避暗实验结果 对照组与模型组相比，无论是学习成绩，还是记忆成绩，都表现出了差异性，具有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)；除了低剂量组记忆成绩中的潜伏期与模型组相比没有表现出明显差异外，低剂量和高剂量的其余数据都差异明显(P＜0.05)，学习和记忆成绩都好于模型组。见表1。 　　表1 各组小鼠避暗实验成绩（略） 　　与模型组比较:1)P＜0.05,2)P＜0.01；下表同 　　2.2 Morris水迷宫实验成绩 对照组的学习记忆成绩都好于模型组，数据的差异性，具有统计学意义(P＜0.05)；除了低剂量组的穿越次数与模型组相比差异不明显外，低剂量组和高剂量组的其余数据都差异明显,具有统计学意义(P＜0.05)，学习记忆成绩都好于模型组。见表2。 　　2.3 小鼠脑组织MAO和GSHPx活性的测定结果 模型组的MAO活性高于对照组（P＜0.01）；而低剂量组和高剂量组的MAO活性又低于模型组(P＜0.05)。模型组的GSHPx活性低于对照组(P＜0.05)；而高剂量组的GSHPx活性又高于模型组(P＜0.05)。见表2。 　　表2 各组小鼠水迷宫实验成绩和脑组织MAO、GSHPx活性（略） 　 　3 讨论 　　D半乳糖在体内利用过程中，可产生过量的自由基，诱发动物的衰老，引起痴呆样的行为及病理性改变，导致细胞肿胀、代谢紊乱、体内活性氧水平升高、细胞膜脂质受损，以至引起多器官系统功能的衰退〔2〕。本实验的行为检测结果与之一致,即模型组小鼠的学习记忆出现了障碍,同时小鼠的状态也明显下降,表现为:毛色灰暗、稀疏，行动缓慢，步态蹒跚，皮下脂肪减少。但是当补充螺旋藻后，低剂量组和高剂量组的学习记忆能力又不同程度得到恢复，说明螺旋藻可以改善由D半乳糖所导致的学习记忆障碍。 　　本研究表明，衰老模型组的MAO活性比对照组高，当补充螺旋藻后， 治疗 组的MAO活性又降低。MAO是动物脑中单胺类递质的氧化分解酶，主要存在于细胞内线粒体外膜上，作用的底物是去甲肾上腺素、多巴胺、肾上腺素等单胺类物质。裘月等〔3〕的研究发现，当机体衰老时，动物脑内的MAO活性升高，使递质高度氧化，造成单胺类神经递质的减少；与此同时，MAO在分解多巴胺的过程中，又可以产生 H2O2，H2O2与脑内Fe2＋进一步反应则可产生自由基，从而导致神经细胞的损伤，影响学习记忆功能。由此MAO被认为是衰老的分子标志之一，MAO活性可间接反映生物体的衰老程度，故又称为“衰老相关酶”。模型组的MAO活性升高，说明通过D半乳糖建模成功。当补充螺旋藻后，其中的某种成分通过某种机制又使MAO活性降低。MAO活性被抑制，可导致内源性单胺的蓄积，从而恢复记忆能力〔4〕。另外，衰老模型组的GSHPx活性比对照组低,当补充螺旋藻后,GSHPx 的活性又升高。GSHPx也是机体内清除自由基的重要抗氧化酶之一,可抵抗氧自由基损伤,维持组织、细胞和蛋白质的正常结构与功能。在维持机体氧化还原平衡等方面发挥重要作用,是抗衰老的重要指标〔5〕。 　　螺旋藻营养丰富，含有18种氨基酸、12种矿物质、8