第12章节植物体细胞胚胎发生.pptVIP

（一）、体细胞胚发生中基因表达的激素调控 **植物体细胞胚发生与激素关系密切，有些激素（2,4-D）对禾谷类植物的体细胞胚发生具有决定性作用。 1、细胞分裂素对基因表达的调控 **有研究表明，细胞分裂素能直接调控细胞核基因的活性，此外，还调控蛋白质的磷酸化以及调控蛋白质的翻译，进而调控体细胞胚的形成。 2、生长素对基因表达的调控 **60年代初Key等人提出“基因表达活化”假说，认为生长素调解生长过程所必需的蛋白质合成的mRNA形成。 **最近有研究表明，植物生长素能诱导mRNA的合成，而且能调控细胞内mRNA的含量水平。 **在苜蓿的体细胞胚发生的研究中,证明2,4-D可以诱导编码富含脯氨酸的小分子蛋白质基因（MsPRP5）的 表达，在脱分化的愈伤组织中MsPRP5 mRNA的积累与2,4-D的浓度有关，100μmol/L的2,4-D处理愈伤组织20min，mRNA的量开始增加，处理24-48h mRNA的量达到高峰（Gyorgyey等，1997）。 (三)、蛋白质磷酸化与基因表达 **蛋白质的磷酸化和去磷酸化在蛋白质因子的激活、基因转录的调解中起重要作用。 **在植物的发育和代谢调控中，蛋白质的磷酸化起重要的作用，蛋白质的磷酸化可通过蛋白质构象的变化来激活或改变蛋白质的功能. Olah等（1989）发现苜蓿的培养物中有一种50kDa蛋白，这种蛋白可被Ca2+和自身的磷酸化作用激活，这种蛋白是一种Ca2＋依赖性的蛋白质激酶，但它的功能还不清楚。 （四）、体细胞胚发生中DNA的甲基化对基因表达的调控作用 **DNA甲基化有许多重要的生物学功能，包括DNA复制起始、突变、限制修饰系统、基因表达调控及组织分化等。 **DNA甲基化主要发生在胞嘧啶C上，特别是在鸟嘌呤G旁边的C上，CpG上的C是最容易甲基化的位点：5’-GCm-3’。 **Loschiava等（1989）研究表明，2,4-D与DNA甲基化有关，当胡萝卜悬浮培养物在含高浓度的2,4-D的培养条件下，核DNA的甲基化从16％增加到45％；核DNA甲基化的增加，表明对基因的抑制作用增强；当去除2,4-D并降低细胞密度时，核DNA便去甲基化。 * * 第十二章 植物体细胞胚胎发生 第一节 体细胞胚胎发生的方式 第二节 影响体细胞胚胎发生的因素 第三节 体细胞胚胎发生中基因表达与调控 第一节 体细胞胚胎发生的方式 植物体细胞胚（plant somatic embryos ）：在离体培养过程中由植物外植体 或愈伤组织产生与受精 卵发育方式类似的胚胎 结构现象。 一、体细胞胚胎发生（Somatic embryogenesis）的特点 **植物的胚胎发生是从合子开始的。 **单细胞悬浮培养、原生质体培养和花粉培养中都观察到体细胞胚胎发生或花粉胚胎发生（pollen embryogenesis） **合子发育的胚胎为二倍体的体细胞产生的胚状结构 **体细胞胚胎是由小孢子或其分裂产物等单倍体细胞产生的体细胞胚，通常称花粉胚（pollen embryos），可发育成单倍体植株。 花粉培养 单细胞悬浮培养 原生质体培养 组织器官培养 体细胞胚 花粉胚 非合子胚 非合子细胞 合子胚 无融合生殖胚 **体细胞胚或花粉胚都是指在植物组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的胚状结构，包括以下几点含义： 1、体细胞胚是组织培养的产物，区别于无融合生殖的胚，只限于在组织培养范围使用； 2、体细胞胚起源于非合子细胞，区别于合子胚； 3、体细胞胚形成经历胚胎发育过程，区别于组织培养的器官发生中芽与根的分化。 二 体细胞胚发生意义 植物体细胞胚胎发生和诱导器官发生相比 具有明显的特点： 1具有两极性 2存在生理隔离 3遗传性相对稳定 4重演受精卵形态发生的特性 (A) 伸长期合子；(B) 合子经过第一次分裂, 产生1 个顶细胞(绿色)和一个基细胞(粉红色)；(C) 四分体胚: 顶细胞经历2 次纵向分裂，产生含有4 个细胞的胚体和2 个细胞的胚柄；(D) 16 细胞球形胚: 8 细胞胚的所有细胞经过1 次平周分裂, 产生包含8 个细胞的表皮原和8 个细胞的内部组织；(E) 早期心形胚；(F) 心形胚: 子叶和胚根原基已经出现；(G) 成熟胚胎。 1: 顶细胞; 2 : 基细胞; 3: 胚根原细胞, 形成未来的ROC 和根冠中央区; RM: 根尖生长点; SM: 茎尖生长点 图6.2 双子叶植物拟南芥的胚胎发育过程 第二节 影响体细胞胚胎发生的因素 1、基因型与体细胞胚发生 基因型是影响体细胞胚发生的重要因素，体细胞胚的诱导率和每个胚性外植体上体细胞胚的发生率因基因型而异 （a