第6章节第2节基因工程及其应用.pptVIP

(2)基因的针线：DNA连接酶 2、基因工程的基本工具 C T T A A G A A T T C G (2)基因的针线：DNA连接酶 C T T A A G A A T T C G 2、基因工程的基本工具 DNA连接酶 重组DNA分子 DNA连接酶和DNA聚合酶的异同 DNA连接酶 DNA聚合酶 作用 形成磷酸二酯键 对象 DNA片段 单个脱氧核苷酸 模板 不需要 需要 重组质粒的构建 …GAATTC …CTTAAG GAATTC… CTTAAG… 酶切 酶切 质粒 目的基因 必须是同一种限制酶 AATT TTAA 思考：如何将重组DNA分子送入受体细胞呢？ DNA连接酶 质粒是存在于细菌细胞质中独立于拟核而自主复制的环状双链DNA分子。 （3）基因的运输工具——运载体 2、基因工程的基本工具 常用的运载体： 质粒、噬菌体、动植物病毒。 二、基因工程的“工具” 运载体的特点 1.能在受体细胞中复制并稳定保存2.具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入3.具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。 例题：下面是四种不同质粒的示意图，箭头表示一种限制性核酸内切酶的酶切位点。 其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因， tet为四环素抗性基因， 若要得到一个能在四环素培养基上生长， 而不能在氨苄青霉素培养基上生长的含重组DNA的细胞，应选用的质粒是 3、基因工程的基本操作步骤： 四步曲： 1、获取目的基因 2、目的基因与运载体结合 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测和鉴定 三、基因操作的基本步骤 细菌 取出质粒 用相同的限制酶切出黏性末端 供体细胞 取出DNA分子 用限制酶切取目的基因 将目的基因插入质粒切口 用DNA连接酶将目的基因与质粒相连 将重组DNA分子导入受体细胞 重组DNA分子增殖、表达 检测目的基因产物 基因工程的遗传学原理： 基因重组 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 人类需要的基因产物 不同生物间的基因重组(定向变异） 操作环境 操作对象 操作水平 操作过程 结果 原理 优点 定向改造生物的遗传性状； 克服了远缘杂交不亲和的障碍。 二、基因工程的应用 资料1：1993年，中国农业科学院的科学家成功培育出了抗棉铃虫的转基因抗虫棉。抗虫的基因来自苏云金杆菌。苏云金杆菌形成的伴胞晶体是一种毒性很强的蛋白晶体，能使棉铃虫等鳞翅目害虫瘫痪致死。科学家将编码这个蛋白质的基因导入作物，使作物自身具有抵御虫害的能力。如今，科学家已利用这一基因成功培育出了抗虫的烟草、玉米、水稻和棉等多种生物。抗虫基因作物的使用，不仅减少了农药的用量，大大降低了生产成本，而且还减少了农药对环境的污染。 应用一：作物育种 利用基因工程的方法，获得高产、稳 产和具有优良品质的农作物，培育出具有各种抗逆性的作物 新品种。 基因工程培育抗虫棉的简要过程 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 上述培育抗虫棉的关键步骤？ 资料2：许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限，其价格往往十分昂贵。微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内，让它们产生相应的药物，不但能解决产量问题，还能大大降低生产成本。 基因工程疫苗和药物 资料3：胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取，100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素。将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌，每2000L培养液就能产生100g胰岛素,相当于从2t猪胰腺中提取的量！用基因工程方法生产的药物还有干扰素、白细胞介素、溶血栓剂、凝血因子，以及预防乙肝、霍乱、伤寒、疟疾的疫苗等。 应用二：药物研制 利用基因工程的方法能够高效率的生产出 各种高质量、低成本的药品，如胰岛素、干扰素和乙肝疫苗等。 资料4：通常一种细菌只能分解石油中的一种烃类，用基因工程培育成功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类等有毒化合物。有的还能吞食转化汞、镉等重金属，分解泄漏的石油，处理工业废水等。 应用三：环境保护 利用转基因细菌降解有毒有害的化合物，吸收环境中的重金属，分解泄漏的石油，处理工业废水等。 1990年，美国孟山都公司把苏云金杆菌基因插入棉花植株获得了转基因棉花植株，经与农业研究局和一些大学科学家连续两年的田间试验，防治虫害效果良好。