DNA的生.pptx

第十一章DNA的生物合成 （复制）DNA Replication;DNA;DNA的生物合成：细胞内合成DNA的过程 1、复制：以DNA作为模板指导的DNA合成，即将DNA携带的信息传至子代DNA。 2、 反转录：DNA合成也可以RNA为模扳指导合成作用，见于RNA病毒。 3、修复合成：当各种因素引起DNA损伤时，损伤DNA可修复合成，校正错误，完成正确合成，以保持DNA结构 的稳定性和遗传信息的准确性。 ;第一节 DNA 复制 一、复制的特征 （一）半保留复制---semiconservative replication 两个子代分子中各有一条链来自亲代，各有另 一条新合成的链，这种复制方式叫半保留复制。 [提问]? DNA的合成是否为全保留复制方式？ ? DNA的合成是否为混合式复制方式？ ? DNA的合成是否为半保留复制方式？ [实验证据]：1957年 M.Meselson 和F.W.Stahl用大 肠杆菌为材料，在含15N和14N的NH4cl中培养证实 了半保留复制方式。（图11-1） Cscl梯度离心的结果。（图11-2 ）;（二）复制的起始点与方向 亲代DNA开链，复制起始点呈叉型移动。（图11-3） 1、复制起始点： DNA复制要从DNA分子的特定部位 开始，此部位称复制起始点。（图11-3加） 原核：仅含一个 ，约245 bp,特殊的重复序列。 真核：多个起始点 例：酵母17号染色体含400个。 2、复制方向：含三种机制 ?2个起点，2个叉，各合一条链（腺病毒）。 ?一个起点一个叉，同方向合成两条链（质粒ColEI ?一个起点2个叉，不同方向合成两条链，此为常 见方式。（图11-4）;（三）半不连续合成semidiscontinuous replication ;二、复制过程和参与酶及因子 （一）复制的起始（分两步） 1、螺旋的松弛与解链 （1）拓扑异构酶---能改变DNA空间构型的酶 作用： DNA复制时松弛超螺旋，以利复制叉的行进及DNA合成，合成后再引向超螺旋。 功能：不清楚，可催化体外拓扑异构化反应，分两型。;?拓扑异构酶I （topoisomerase-- I ） 作用：（图11-6加） 松弛超螺旋，不需ATP, 机制：切开环状一条链 打结与解结 环状双链DNA的合成 环连与解环连 原核：对负超螺旋?正 真核：对正、负均有作用。 ?拓扑异构酶I I ----旋转酶（gyrase） 作用： 松弛超螺旋 松 + ATP 超 （ - ） 切开环状两条链;打结与解结 环连与解环连 （图11-6） （2）解链酶 （helicase）------复制蛋白rep 作用：ATP供能时，解开DNA双链。 原核：编码解链酶的基因是dnaB,DnaB表示蛋白产 物。前导链结合rep蛋白，随从链 结合解链酶II Ⅲ （图11-7）。 （3）单链结合蛋白-single strand binding protein-SSB 作用： ? SSB与解开DNA单链结合，保护稳定DNA。 ?与新复制DNA单链结合，以防降解。 超螺旋DNA 拓扑酶 松弛 解链酶 解开双链 SSB 复制开始;2、引发 （需引发酶及引发前体参与） （1）引物酶（primase） 作用：以DNA为模板，自5’?3’合成RNA小片段, 3’末端为-OH，长短：十几到几十个核苷酸。 原核：dnaG基因编码DnaG蛋白即引物酶。 （2）引发前体（preprimosome） 由多种蛋白因子组成复合物。 作用：合成RNA引物，沿随从链复制叉的行进方向移动，在不同部位，合成RNA引物。 总结：合成RNA引物，在引物3’-OH末段进行DNA片 段合成。（表11-1） （二） DNA链的延长 反应体系： DNA模板， DNA聚合酶， dNTP，引物，Mg2+离子 ;过程：引物3’-OH dNTP ? ppi 引物-dNMP 反应式：DNA+dNTP ?（DNA）n+1+ppi 反应机理：（图11-8加1）?磷亲核攻