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第四章 食品毒理学实训;实训一 实验动物的饲养管理;二、仪器和材料
小鼠、大鼠、兔、饲养盒、垫料、水瓶及辅助器材、开口器、体温表等;三、操作方法
1.大、小鼠的日常饲养管理
(1) 进入屏障动物房的准备
(2) 进入动物房后的观察
(3) 大、小鼠的喂料
(4) 大、小鼠的喂水
(5) 大、小鼠换饲养盒
(6) 清洁卫生和消毒
(7) 记录 ;2.兔的日常饲养管理
(1) 工作人员进入兔室前须着工作服,穿胶鞋,戴口罩,戴手套、帽子。
(2) 进入兔室后先观察兔只健康状况,记录异常兔只并交由兽医师处置。
(3) 饮水
(4) 饲料
(5) 卫生消毒
(6)记录 ;3.实验动物健康的观察和评价
(1)动物的外表与行为观察
(2)个体检查
(3)采食和饮水观察
;四、实训结果
1.计算动物一昼夜之内的摄食量和饮水量。
2.对动物进行观察检查后,认真填写以下记录表,作出相应评???。 ; 健康观察记录表
动物品系:;实训二 实验动物的分组、 标记和染毒技术;二、仪器和材料
1.实验动物:成年健康小鼠、大鼠、豚鼠、家兔若干只。
2.染料:结晶紫、苦味酸、品红。
3.毛笔或棉签。
4.动物称或天平
5.灌胃针 ;三、操作方法和步骤
(一)健康动物的选择和性别鉴定
1.健康动物选择:
2.性别鉴定: ①大、小鼠;②豚鼠;③家兔。 ;(二)称重、分组与标记
1.称重:根据不同试验要求,选择不同体重的动物。在同一组内,同性别动物体重差异应小于平均体重的10%,组间同性别动物体重均值应小于5%。称量大、小鼠体重时天平的感量要求在0.1 g以下。 ; 随机分组表; 3.编号及标记
(1)染色法。染料有苦味酸酒精饱和液(黄色)、甲基紫酒精饱和液(紫色)或美蓝溶液(蓝色)、0.5%中性红或品红溶液(红色)等。具体方法:a.按右上肩、右肋、右后肢、颈部、背中、尾根、左前肢、左肋、左后肢顺序分别为1-9号,不染色为10号[图4-1(a)];b.以头部为1号,按顺时针方向依次在右耳、右前肢、右后肢、颈部、背中、尾根、左耳、左前肢、左后肢染色,分别为2-10号[图4-1(b)] 。 ;图4-1大鼠和小鼠染色标号法 ;(2)耳缘孔口法。大、小鼠常用此法。在耳缘不同部位(图4-2)用针穿孔和剪刀剪口,穿孔和剪口后,用墨黑酒精液涂抹,使其着色,不易脱失。常以右耳代表个位,左耳代表十位。孔表示1号、2号、3号和10号、20号、30号,一道口为4号、5号、6号和40号、50号、60号,二道口为7号、8号、9号和70号、80号、90号。穿孔和剪口配合,也可编1-99号,不穿不剪为100号。 ;;(3)烙印法。适用于兔以上的动物。耳部消毒后,用刺数钳在动物耳上刺号,再以墨黑酒精液着色。也可用铸铁号码烧红后烙在动物体表部位,留下标记。这种方法可较长时间保留记号,适用于大动物标记。
(4)号牌法。适用于大动物。将金属或塑料牌号固定在该动物的耳上或颈下,也可挂在饲养动物的笼上。 ;(三)抓取和固定方法
1.小鼠 捉拿方法有二种:一种办法是用右手提起尾部,放在鼠笼盖或其它粗糙面上,向后上方轻拉,此时小鼠前肢紧紧抓着粗糙表面,轻轻抚摸,使安静,然后迅速用左手拇指和食指捏住小鼠双耳和颈背部皮肤,并以小指和手掌尺侧夹持其尾部固定于手中(如图4-3);另一种抓法只用左手,先用食指和拇指抓住尾都,再用手掌尺侧及小指夹住尾根,然后用拇指及食指捏住其颈部皮肤。后者适于快速捉拿给药。 ;;2.大鼠 基本同小鼠,但大鼠牙齿很尖利,不要突然袭击式去抓。捉拿时右手慢慢伸向抓鼠尾,尽可能向尾根部靠近,将大鼠放在粗糙面上;左手戴防护手套,抓起其颈背部尽可能多的皮肤并固定其头部以防咬伤(如图4-4)。也可将大鼠固定在固定器。注意捉拿时勿用剧烈动作激怒之。
3.豚鼠 以拇指和中指从豚鼠背部绕到腹下,另一只平托其臀部(如图4-5)。体重小时可用一只手捉拿,体重大时宜用双手。;4.家兔 用右手大把抓住颈背部皮肤,轻轻提起,左手立即托住家兔的臀部或腹部,使其重量移向左手(图4-6),这样既不伤害家兔,也避免兔抓伤人。捉家兔切忌只抓两耳。
;(四)染毒方法
1.大、小鼠灌胃法: 使用lmL注射器和灌胃针,用左手拇指和食指捏住大、小鼠两耳及头后皮肤,其余手指将大鼠或小鼠的背部皮肤和尾巴压在手掌间,使其躯干垂直,腹部朝内,头部向上,略有一个倾斜度,固定好后,右手持注射器,将针头由动物口角插入口腔,避开牙齿,再从舌面沿咽后壁顺着吞咽动作徐徐滑入食道下端,遇有阻力时
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